植物蛋白互作研究的利器:LUC實驗與UVP ChemStudio 695的強強聯合
熒光素酶互補實驗(Luciferase Complementation Assay簡稱LUC,LCI,SLC,SFLC,LCA等)是一種以熒光素為底物來檢測熒光素酶活性的植物活體成像實驗。實驗中,熒光素酶蛋白被切成N端和C端2個功能片段,即NLuc和CLuc。在一個實驗體系中,待檢測的2個目標蛋白分別與NLuc和CLuc融合,如果2個目標蛋白相互作用,則熒光素酶的NLuc和CLuc在空間上會足夠靠近并正確組裝,從而發揮熒光素酶活性,氧化底物熒光素產生最強波長在560nm左右的生物熒光。
LUC實驗流程如下:
LUC實驗目前已成為高校科研植物學熱點研究手段,主要用于植物蛋白互作研究。通過觀察分析熒光素酶與底物之間的相互作用,研究人員可以發現新的蛋白質相互作用網絡。蛋白互作研究可用于植物學多個應用領域:如真菌、細菌等的植物致病機制研究,為植物保護提供有力支持;植物激素、代謝信號通路轉導研究,為研究植物的生長、發育和抗寒、抗旱、耐鹽等抗逆機制提供有力的研究工具。
中國科學院上海植物生理生態研究所林鴻宣院士研究團隊在植物學領域頂級期刊《Molecular Plant》(影響因子26)發表重要研究成果,系統解析了α/β水解酶家族成員STH1基因在水稻鹽脅迫應答與生殖發育協同調控中的分子機制。該研究通過正向遺傳學方法從非洲稻(Oryza glaberrima)中成功克隆STH1基因,并首次揭示其通過三個獨立且協同的分子功能模塊(膜脂代謝調控、蛋白穩定性調控、光周期信號整合)實現環境適應與發育進程的動態平衡。研究團隊通過熒光素酶報告基因(LUC)實驗證實,STH1通過直接激活Hd3a啟動子活性正向調控水稻開花進程,而鹽脅迫誘導的STH1表達抑制則導致開花延遲,使植株優先將資源分配至脅迫防御系統。
值得注意的是,德國耶拿公司UVP ChemStudio PLUS多功能成像系統憑借其高靈敏度化學發光檢測能力,成功實現了煙草葉片中熒光素酶信號的實時動態捕捉,為解析STH1-Hd3a轉錄調控網絡提供了關鍵實驗證據。該研究不僅創制了耐鹽性提升67.14%的優異等位變異種質,更為作物抗逆與穩產協同改良提供了理論依據。
德國耶拿UVP ChemStudio 695多功能成像儀可完美支持LUC實驗的植物活體成像,具有605萬高分辨率相機,F0.95大孔徑鏡頭,高光電轉化率(78%),低讀出噪音(3e-@1.7MHz),低暗電流( 0.0007 e/p/s )及相對-60℃的制冷能力,結合矩陣式RGB三色LED、氙燈和近紅外激光等高強度光源,可為客戶帶來高清晰度,高靈敏度的成像體驗!這款儀器不僅適用于熒光素酶互補實驗的植物活體成像,亦可兼容常規如核酸膠、蛋白膠、化學發光WB和熒光WB等成像實驗,滿足您所有的成像需求!
UVP ChemStudio 695多功能成像儀
高性能的CCD相機:光電轉化率高、背景噪音低
功能齊全:核酸/蛋白凝膠成像、WB化學發光成像
可擴展性:支持WB多色熒光成像、WB近紅外熒光成像、植物活體成像
具有審計追蹤功能,方便實驗室管理和文章評審的溯源,為您的論文發表保駕護航!
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