在重組蛋白的純度檢驗、生物藥的多聚體分析中經常會使用到UHPLC-SEC方法。但在進行微量分析時候，SEC色譜柱中的蛋白質有時會因非特異性吸附而導致定量和重現性出現問題。另外，在使用光散射分析多聚體或質譜分析時，有時會因為柱流失產生的干擾物質而無法進行精確檢測。東曹新一代UHPLC-SEC色譜柱TSKgel UP-SW3000-LS可以解決此類分析難題。

蛋白質非特異性吸附的對比

將微量的標準蛋白質混合溶液 (全部2.5 mg/次) 連續10次進樣至UP-SW3000-LS色譜柱中，將第10次的洗脫峰面積作為100時的第1次的洗脫峰面積，并計算出蛋白質的非特異性吸附率。結果表明，TSKgel UP-SW3000-LS的非特異性吸附率約為2.5%，是現有產品UP-SW3000色譜柱以及其他市售UHPLC-SEC色譜柱的一半以下。

圖1.  不同色譜柱蛋白質非特異性吸附的對比

根據使用TSKgel UP-SW3000-LS時的蛋白質非特異性吸附率進行反向推算，使用該色譜柱只需2次進樣（老化處理）即可準確分離微量蛋白樣品并可獲得良好的重現性。

光散射檢測抗體藥物異質性

使用SEC法分析抗體藥物的分子大小變異體時，由于UV檢測可獲得的信息有限，所以一般推薦通過光散射檢測器進行分析。然而，在LS檢測時，會因色譜柱流失而檢測到尖峰噪聲和鬼峰，而導致檢測精度降低。TSKgel UP-SW3000-LS在設計上可抑 制這類尖峰噪聲和鬼峰的出現，進而能夠準確的進行LS檢測。

圖2. 與MALS檢測器的聯用分析

質譜分析時的柱流失情況對比

將質譜檢測器連接到SEC分析系統對抗體分子大小變異體、糖鏈結構進行分析的應用越來越多。但同LS分析一樣，MS分析也會因柱流失的影響導致分析困難。

使用TSKgel UP-SW3000-LS，在最初的色譜柱平衡過程中就能去除幾乎所有脫落的干擾物質，在之后進樣空白樣品 (洗脫液) 時，柱流失也非常少，與市售其他品牌的UHPLC-SEC色譜柱相比，可獲得重現性更好的基線。

圖3. ESI-MS應用時兩種UHPLC色譜柱柱流失比較

TSKgel UP-SW3000-LS產品信息