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- 厄爾多思2 2017-02-24 00:00:00
- 選擇目的基因，并設(shè)計(jì)相應(yīng)引物； 用引物PCR擴(kuò)增目的基因片段； 選擇合適（抗性標(biāo)記、酶切位點(diǎn)等）的克隆載體（為了保真擴(kuò)增），并將PCR片段連接入克隆載體中；（一般用Taq酶的PCR產(chǎn)物在末尾會(huì)自帶一個(gè)A，可在Solution 1作用下與兩端各帶一個(gè)T的線性T載體直接相連） 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化入感受態(tài)大腸桿菌，使之在含有抗生素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)擴(kuò)增； 從大腸桿菌中提取質(zhì)粒（即前面的連接產(chǎn)物），酶切鑒定和測(cè)序鑒定均無(wú)誤后將目的基因片段切下并與新的表達(dá)載體連接，然后再次轉(zhuǎn)化入大腸桿菌中擴(kuò)增，再提質(zhì)粒，即得到想要的目的基因片段克隆.
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