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【假期清潔小貼士】色譜柱篇

來源:沃特世科技(上海)有限公司(TA)      分類:科技文獻 2024-01-31 09:14:46 493閱讀次數
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在液相分析中,色譜柱性能對實驗結果好壞有直接影響。長假來臨之際,妥帖安置好自己的日常工作“小伙伴”,才能保障年后順利復工!借此機會小編來給大家介紹一些色譜柱的清洗維護方法。


反相色譜柱清洗流程


適用于T3/C18+/Shield RP18/C18SB等C18、C8、苯基、氟苯基等鍵合相。


1.

90%水相(若分析方法初始水相比例高于90%,可使用相同的水相比例)等度洗脫10-20個柱體積,保證緩沖鹽及極性大的成分(如糖、醇等組分) 沖洗干凈; 

2.

梯度方式過渡至50%有機相并等度洗脫10-20個柱體積,以沖洗中等極性組分;

3.

梯度方式過渡至100%有機相,并Z后用100%有機相等度洗脫10-20個柱體積,保證非極性、強保留成分沖洗干凈;

4.

柱溫在色譜柱耐受范圍內將提高2-5度,方法運行完及時關閉柱溫;

5.

反相色譜柱長時間保存時建議使用100%乙腈或甲醇。


表1. 不同內徑及長度色譜柱柱體積參考表。


以4.6 × 150 mm規格色譜柱為例,柱體積為2.5 mL時,可參考如下沖洗梯度:若樣品分析方法中初始水相比例更高,建議與分析方法保持一致,如有需要可反復沖洗2-3次。


圖1. 沖洗梯度。


HILIC模式色譜柱清洗流程


適用于HILIC/BEH Amide/BEH Z-HILIC等色譜柱。


對于HILIC模式色譜柱,參照如下方法進行清洗,如有必要可反復沖洗2-3次。


  • 若流動相體系中不含緩沖鹽


1.

95:5的乙腈:水等度洗脫10-20個柱體積,將極性小的組分沖洗干凈;

2.

梯度洗脫至50:50的乙腈:水,并等度維持10-20個柱體積,沖洗中等極性的組分;

3.

將流速降低至原流速一半(如由1 mL/min降至0.5 mL/min),以避免水相升高時突然發生壓力驟升而導致超壓;

4.

梯度洗脫至5:95的乙腈:水,并等度維持10-20個柱體積;對BEH  Amide或BEH Z-HILIC可洗脫至100%水相;

5.

等度5-10個柱體積置換溶劑,并將色譜柱保存在100%乙腈中;

6.

柱溫在色譜柱耐受范圍內將提高2-5度,方法運行完及時關閉柱溫。


  • 若流動相體系中含有緩沖鹽時: 

1.

先用50:50的乙腈:水等度沖洗,去除緩沖鹽;

2.

再按照不含緩沖鹽步驟1開始進行清洗。


在色譜柱清洗完成后,可參考【假期關機小貼士】儀器篇再對您的儀器進行維護。


除了清洗維護,在日常工作中您可能想了解:


  • 拿到一支新色譜柱,怎么活化?

  • 色譜峰拖尾了,怎么優化?

  • 換了色譜柱結果不重現,怎么排查?

  • 小顆粒色譜柱壓力升高,怎么排查?


此類疑問您可在公眾號-耗材應用-消耗品資料庫-色譜柱的使用維護/資料工具與常見問題中查詢。


色譜柱的使用維護/資料工具與常見問題(左右滑動查看)


如需更多幫助,可致電800(400)-820-2676與我們聯系。






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最近更新:2024-10-31 14:58:50
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