【假期清潔小貼士】色譜柱篇
適用于T3/C18+/Shield RP18/C18SB等C18、C8、苯基、氟苯基等鍵合相。
1.
90%水相(若分析方法初始水相比例高于90%,可使用相同的水相比例)等度洗脫10-20個柱體積,保證緩沖鹽及極性大的成分(如糖、醇等組分) 沖洗干凈;
2.
梯度方式過渡至50%有機相并等度洗脫10-20個柱體積,以沖洗中等極性組分;
3.
梯度方式過渡至100%有機相,并Z后用100%有機相等度洗脫10-20個柱體積,保證非極性、強保留成分沖洗干凈;
4.
柱溫在色譜柱耐受范圍內將提高2-5度,方法運行完及時關閉柱溫;
5.
反相色譜柱長時間保存時建議使用100%乙腈或甲醇。
表1. 不同內徑及長度色譜柱柱體積參考表。
以4.6 × 150 mm規格色譜柱為例,柱體積為2.5 mL時,可參考如下沖洗梯度:若樣品分析方法中初始水相比例更高,建議與分析方法保持一致,如有需要可反復沖洗2-3次。
圖1. 沖洗梯度。
適用于HILIC/BEH Amide/BEH Z-HILIC等色譜柱。
對于HILIC模式色譜柱,參照如下方法進行清洗,如有必要可反復沖洗2-3次。
若流動相體系中不含緩沖鹽:
1.
95:5的乙腈:水等度洗脫10-20個柱體積,將極性小的組分沖洗干凈;
2.
梯度洗脫至50:50的乙腈:水,并等度維持10-20個柱體積,沖洗中等極性的組分;
3.
將流速降低至原流速一半(如由1 mL/min降至0.5 mL/min),以避免水相升高時突然發生壓力驟升而導致超壓;
4.
梯度洗脫至5:95的乙腈:水,并等度維持10-20個柱體積;對BEH Amide或BEH Z-HILIC可洗脫至100%水相;
5.
等度5-10個柱體積置換溶劑,并將色譜柱保存在100%乙腈中;
6.
柱溫在色譜柱耐受范圍內將提高2-5度,方法運行完及時關閉柱溫。
若流動相體系中含有緩沖鹽時:
1.
先用50:50的乙腈:水等度沖洗,去除緩沖鹽;
2.
再按照不含緩沖鹽步驟1開始進行清洗。
在色譜柱清洗完成后,可參考【假期關機小貼士】儀器篇再對您的儀器進行維護。
除了清洗維護,在日常工作中您可能想了解:
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此類疑問您可在公眾號-耗材應用-消耗品資料庫-色譜柱的使用維護/資料工具與常見問題中查詢。
色譜柱的使用維護/資料工具與常見問題(左右滑動查看)
如需更多幫助,可致電800(400)-820-2676與我們聯系。
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