本標準適用于地表水、地下水、生活污水和工業廢水中草甘膦的測定。

規范性引用文件

《HJ 91.1 污水監測技術規范》、《HJ/T 91 地表水和污水監測技術規范》、《HJ/T 164 地下水環境監測技術規范》。

方法原理

樣品在 pH 為 4～9 的條件下加入二水合檸檬酸三鈉，經過濾或固相萃取凈化后與 9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC-Cl)進行衍生化反應，生成的熒光產物經二氯甲烷萃取凈化去除衍生化副產物后，用具有熒光檢測器的高效液相色譜分離檢測。以保留時間和特征波長定性，外標法定量。

儀器和設備

1、高效液相色譜儀(HPLC)：具有熒光檢測器。

2、色譜柱：填料粒徑為5 μm，柱長250 mm，內徑4.6 mm的十八烷基鍵合硅膠(C18)反 相色譜柱，或其它性能相近的色譜柱。

3、固相萃取柱：填料為二乙烯基苯和N-乙烯基吡咯烷酮共聚物或十八烷基硅膠的萃取柱，或同等柱效的萃取柱，規格為500 mg/6 ml。 4、聚乙烯塑料(PE)管：10 ml。 6.5 水平振蕩器。

6、渦旋振蕩器。

7、棕色采樣瓶：250 ml或500 ml帶聚四氟乙烯襯墊的螺旋蓋玻璃瓶或磨口瓶。

8、棕色樣品瓶：2.0 ml帶聚四氟乙烯襯墊的螺旋蓋玻璃瓶。

9、一般實驗室常用儀器和設備。

固相萃取凈化

依次用 6 ml 甲醇(5.2)和 6 ml 水活化固相萃取柱(6.3)，保證小柱柱頭浸潤。量取10 ml 樣品，加入 29.3 mg 二水合檸檬酸三鈉(5.10)，混勻后以約 3 ml/min(約 1 滴/秒)的流速通過固相萃取柱，收集凈化后的樣品，待衍生。

液液萃取凈化

在衍生后的樣品中加入 5 ml 二氯甲烷(5.3)，置于渦旋振蕩器(6.6)上渦旋萃取 2 min，取水相層，經濾膜(5.18)過濾，收集 1 ml 濾液于棕色樣品瓶(6.8)中，待測。

液相色譜參考條件

流動相A：乙腈(5.1)，流動相B：磷酸溶液(5.9)，梯度洗脫程序見表1;

流速：1.0 ml/min;柱溫：30℃;進樣量：20 μl;

激發波長：254 nm;

發射波長：以302 nm作為檢測波長，以315 nm作為輔助定性波長。

工作曲線的建立

分別取適量的草甘膦標準使用液(5.17)，用水稀釋，制備至少5個濃度點的標準系列，草甘膦的質量濃度分別為0 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L、500 μg/L(此為參考濃度)。