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Hieff UNICON<sup>?</sup> HotStart Taq DNA Polymerase,50 U/μL

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詳細介紹

產品描述
 

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA PolymeraseHieff UNICON® Taq抗體貨號:31301ES)Hieff® Taq DNA Polymerase(貨號10101ES)的混合產品。Hieff UNICON® Taq抗體與Hieff® Taq DNA Polymerase具有很高的親和力,高溫50℃處理30 min,依舊可以封閉Hieff® Taq DNA Polymerase的活性。本品在預變性溫度下加熱30 sec完全失活,釋放出DNA聚合酶活性。使用該熱啟動Taq酶可以有效抑制引物非特異性退火導致的擴增。 

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase適用于熱啟動PCR和qPCR。本品中的Hieff® Taq DNA Polymerase是熱穩定重組型DNA聚合酶,具有較高的模板親和力,非常適合低拷貝模板的擴增。擴增產物具有3′-dA,可輕松克隆T載體。

 

產品組分

 

編號

組分

產品編號/規格

10730ES00

(10 μL)

10730ES01
(100 μL)

10730ES03
(1 mL)

10730ES25
(25 mL)

10730

HotStart Taq DNA Polymerase (50 U/μL)

10 μL

100 μL

1 mL

25 mL

 

產品應用

 

低拷貝基因擴增、基因型鑒定

 

活性定義

 

用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物,74℃,30 min內,攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個活性單位(U)。

 

運輸與保存方法

 

冰袋運輸。-20℃保存,有效期2年

 

PCR反應體系(50 μL)

 

組分

體積 (μL)

終濃度

2×Taq Buffer(含Mg2+、dNTP)

25

模板DNA

-

-

Forward primer (10 μM)

2

0.4 μM

Reverse primer (10 μM)

2

0.4 μM

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase (50 U/μL)

0.05

2.5 U/50 μL

ddH2O

to 50

-

【注】

1)試劑使用:各組分使用前需充分融化混勻。

2)聚合酶濃度:推薦使用2.5 U/50 μL。可以在1.25-5 U/50 μL之間進行優化。

3)Mg2+終濃度體系終濃度為2 mM。如有特殊需要,可用25 mM MgCl2,以0.2-0.5 mM為間隔向上摸索。

4不同模板的推薦使用量(50 μL反應體系)

 

模板種類

模板使用量

基因組DNA

50 ng-200 ng

質粒DNA

100 pg-20 ng

cDNA

1-5 μL (不超過反應體系的1/10)

 

PCR擴增程序

 

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

95℃

1 min

1

變性

95

10 sec

35-40

退火

60

20 sec

延伸

72

30 sec/kb

終延伸

72

10 min

1

【注】:
1)退火溫度和時間:溫度推薦使用50-60℃。退火溫度過低會導致非特異性擴增。引物設計參考熒光定量引物標準。推薦退火時間設置為20 sec,可以在10-30 sec內調節。

2)延伸溫度和時間:溫度推薦使用72℃。時間推薦使用30 sec/kb。

3)擴增產物:請將PCR擴增產物放置于-20℃保存,防止DNA發生降解。

4)擴增程序:本產品用于定量實驗,可使用2步法程序擴增,去掉延伸步驟,退火和延伸合為一步,對應的時間常用30 sec或根據儀器型號設置,如Applied Biosystems 7300需用31 sec以上。

 

注意事項

 

1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
2)本產品僅作科研用途!

 

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產品名稱

貨號

規格

價格(元)

促銷價(元)

Hieff Unicon® Hotstart Direct Taq DNA Polymerase, 5 U/μL

10717ES72

250 U

362.00

 

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10717ES76

500 U

692.00

 

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10717ES80

1000 U

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10717ES92

10 KU

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100mL

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20×5mL

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11213ES60

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2782.00

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1000T

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10000T

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詢價


HB210906

 

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