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人胚腎細胞
- 品牌：北納生物
- 型號： BNCC100530
- 產地：北京 朝陽區
- 供應商報價：面議
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北京北納創聯生物技術研究院
更新時間：2022-07-22 10:46:09 -
銷售范圍售全國
入駐年限第6年
營業執照已審核
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詳細介紹
資源編號：BNCC100530
英文名： 293T
類型： 貼壁生長
形態： CM1-1培養液中，貼壁，上皮細胞樣，多角形，緊密排列
分離基物： 胚腎；5型腺病毒及SV40轉化；女性
提供形式： 復蘇形式：T25培養瓶1瓶；或者凍存形式;2ml凍存管2支，干冰費另計。
安全等級： 1
應用領域： 表達SV40大T抗原，可用于轉染和作為包裝細胞；用于瞬時轉染時可高表達AP融合蛋白。293細胞是轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞系，293T細胞由293細胞派生，同時表達SV40大T抗原，含有SV40復制起始點與啟動子區的質粒可以復制。@2017
培養方法
傳代方法 將舊培養液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM1-1培養液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分3~6皿培養； 生長條件 37℃，5%CO2，CM1-1培養液。CM1-1培養液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培養液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。 生長特性 細胞貼壁不牢，加胰酶消化時，細胞會成塊脫落，過一會就要把多余的胰酶吸走。培養過程中增殖緩慢，細胞密度大概在70%左右。 存儲條件 凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉移至液氮中保存。 293T 人胚腎細胞
貼壁，上皮細胞樣
培養：37℃，5%CO2
編號： 100530
產品形式：2mL 凍存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶
安全等級：一級，安全柜或超凈臺操作
收貨須知：收貨當天發現異常，請在 24 小時內及時聯系客服，逾期視為收貨良好；凍存管形式，收貨后及時置于-80℃冰箱保存，若 長時間不使用，應過夜轉移至液氮保藏；T25 形式，收貨后先培養瓶原裝置于培養箱靜養 4h，然后再對細胞進行常規操作。復蘇時每 管一次用完不得留存，復蘇后傳一代，即可正常使用。請嚴格按照本說明操作，否則造成細胞失活等情形，不予提供補發服務。
培養條件：37℃，5%CO2，90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM 高糖培養液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。
復蘇步驟：
①新制 100mm 平皿 1 個，含 12mL 上述培養液；
②凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后盡快移入 安全柜復蘇；
③用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，順時針搖勻；
④放入（37℃，5%CO2）培養箱中，過夜換液，2-4 天長滿。
傳代/凍存：將舊培養液吸除，PBS 清洗兩遍后，加入 2mL（/100mm 皿/T25 瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在顯微鏡下觀察， 期間禁止搖晃培養皿，細胞剛有脫落時，吸除大部分胰酶，留約 0.5mL，移至培養箱消化，約 0.5min 取出。
①傳代：用 6mL 培養液終止消 化，輕輕吹打均勻細胞，后可 1:2 傳代；
②凍存：則用 3mL 凍存液（50%基礎培養基+40%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為 3 支凍 存管，用程序降溫盒于-80℃凍存。
復蘇質量記錄：根據復蘇要求，對以上細胞株進行復蘇，記錄結果如下：
項目 質量標準 復蘇記錄 復活性 18h 貼壁，80h 長滿 80% 過夜 18h 后觀察貼壁，70h 密度達 80% 細胞形態 貼壁，上皮細胞樣 貼壁，上皮細胞樣，多角形、圓形，緊密排列 附圖 
結論 復活性好，且細胞形態無異常，合格 質檢員/日期： 丁保敏 2021.06.10 審核員簽字：高灝杰
滬公網安備 31011502008050號