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人胚腎細胞
- 品牌：北納生物
- 型號： BNCC338274
- 產地：北京 朝陽區
- 供應商報價：面議
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北京北納創聯生物技術研究院
更新時間：2022-07-22 10:46:09 -
銷售范圍售全國
入駐年限第6年
營業執照已審核
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詳細介紹
資源編號：BNCC338274
英文名： 293 [HEK-293]
類型： 貼壁生長
形態： CM1-1培養液中，貼壁，上皮細胞樣，梭形、多角形。胞漿透亮，胞核隱約可見，有的胞膜向周圍突起成不規則形。
分離基物： 腎;以腺病毒5 DNA 進行轉化
提供形式： 復蘇形式：T25培養瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費另計。
安全等級： 1
培養方法
傳代方法 將舊培養液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM1-1培養液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分3~6皿培養； 生長條件 37℃，5%CO2，CM1-1培養液。CM1-1培養液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培養液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。 生長特性 @2017 細胞復蘇后，5h左右可貼壁生長。傳代后6h大部分細胞已經貼壁，8h細胞已經完全貼壁。3-5天細胞增殖進入指數生長期，6天細胞融合度可達到85%以上，減緩進入平臺期。 存儲條件 凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉移至液氮中保存。 293 [HEK-293] 人胚腎細胞
貼壁，上皮細胞樣
編號： 338274
培養：37℃，5%CO2 CM1-1 培養液
產品形式： 2mL 凍存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶
安全等級： 一級，安全柜或超凈臺操作
收貨須知：收貨當天發現異常，請在 24 小時內及時聯系客服，逾期視為收貨良好；凍存管形式，收貨后及時置于-80℃冰箱保存，若 長時間不使用，應過夜轉移至液氮保藏；T25 形式，收貨后先培養瓶原裝置于培養箱靜養 4h，然后再對細胞進行常規操作。復蘇時每 管一次用完不得留存，復蘇后傳一代，即可正常使用。請嚴格按照本說明操作，否則造成細胞失活等情形，不予提供補發服務。
培養條件：37℃，5%CO2，CM1-1 培養液。CM1-1 培養液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM 高糖培養液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。
復蘇步驟：
①新制 100mm 平皿 1 個，含 12mL 上述培養液；
②凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后盡快移入 安全柜復蘇；
③用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，順時針搖勻；
④放入（37℃，5%CO2）培養箱中，過夜換液，4-6 天長滿。
傳代/凍存：將舊培養液吸除，PBS 清洗兩遍后，加入 2mL（/100mm 皿/T25 瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在顯微鏡下觀察， 期間禁止搖晃培養皿，細胞剛有脫落時，吸除大部分胰酶，留約 0.5mL，移至培養箱消化，約 0.5min 取出。傳代用 6mL CM1-1 培養液 終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分 3~6 皿培養；凍存則用 3mL 凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為 3 支凍存管， 用程序降溫盒于-80℃凍存。
復蘇質量記錄：根據復蘇要求，對以上細胞株進行復蘇，記錄結果如下：
項目 質量標準 復蘇記錄 復活性 18h 貼壁，120h 長滿 80% 過夜 18h 觀察貼壁，110h 密度達 80% 細胞形態 貼壁，上皮細胞樣 CM1-1 培養液中，貼壁，上皮細胞樣，多角形 附圖 
結論 復活性好，且細胞形態無異常，合格 質檢員/日期： 朱玥 2020.10.21 審核員簽字：丁保敏
滬公網安備 31011502008050號