酵母表達載體介紹
畢赤酵母表達系統中常用的表達載體包括分泌表達載體和非分泌型表達載體。因此可以根據基因表達的目的選擇合適的酵母表達載體。分泌型表達載體主要有pPIC9，pPIC9k，pHIL-S1，pPICZa，pYAM75P6；胞內表達的載體主要有：pHIL- D2，pA0815，pPIC3K，pPICZ，pHWO10，pGAPZ， pGAPZa等。
本次主要介紹一下pGAPZA、pGAPZαA和pPIC3.5K這三個載體。
pGAPZA | pGAPZαA | pPIC3.5K | |
啟動子 | GAP | GAP | AOX1 |
抗性 | Zeocin | Zeocin | Kan/Amp |
載體標記 | C-Myc, C-His | C-Myc, C-His | HIS4 |
載體大小 | 2884bp | 3147bp | 9004bp |
信號肽 | 無 | α-factor secretion signal | 無 |
碳源 | 甘油或葡萄糖/無毒 | 甘油或葡萄糖/無毒 | 甲醇/有毒 |
受體菌株 | GS115 | GS115、SMD1168、X-33 | KM71、SMD1168、GS115 |
應用 | 常用于生產胞內蛋白的畢赤酵母表達載體 | 常用于生產分泌蛋白的畢赤酵母表達載體 | 常用于生產胞內蛋白的畢赤酵母表達載體 |
備注 | 穿梭型表達載體，能夠在大腸桿菌和酵母中進行遺傳復制。是以畢赤酵母中磷酸甘油酸脫氫酶 (GAP)基因啟動子是組成型表達的，不存在誘導的問題，可以在以葡萄糖為碳源的培養基上表達。 | 穿梭型表達載體，能夠在大腸桿菌和酵母中進行遺傳復制。是以畢赤酵母中磷酸甘油酸脫氫酶 (GAP)基因啟動子是組成型表達的，不存在誘導的問題，可以在以葡萄糖為碳源的培養基上表達。 | 插入基因是必需包含起始密碼子ATG |
載體圖譜：
pGAPZA載體圖譜：
pGAPZαA載體圖譜：
pPIC3.5K載體圖譜：
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