TSKgel色譜柱清洗方法~SW系列尺寸排阻色譜柱~
GX液相色譜柱是消耗品,會(huì)隨著使用時(shí)間或進(jìn)樣次數(shù)的增加,出現(xiàn)柱效下降無(wú)法達(dá)到分離要求,或伴有峰型拖尾、分叉等情況。需要定期進(jìn)行清洗和再生,以保證色譜柱的柱效和使用壽命。
不同類型的色譜柱都有與之對(duì)應(yīng)的清洗方法。本文為大家介紹TSKgel SW系列硅膠尺寸排阻色譜柱的清洗方法。
根據(jù)樣品性質(zhì),建議先從以下①和②中選擇適當(dāng)?shù)那逑捶椒ǎ恳徊角逑粗g用純水沖洗。清洗色譜柱時(shí)的流速與溶劑替換流速一致。
1 去除離子性雜質(zhì)
使用高鹽濃度的流動(dòng)相(例如:0.5M硫酸鈉,pH3溶液)或酸性水溶液(例如:磷酸鹽緩沖液,pH2.5)過(guò)柱清洗。
2 去除疏水性雜質(zhì)
在清洗液中添加10-20%的甲醇、乙腈等水溶性有機(jī)溶劑過(guò)柱清洗。
如果采用上述兩種方法清洗后色譜柱性能仍不能恢復(fù),再考慮以下第③種方法。
3 去除難溶性蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)
在清洗液中添加6-8mol/L的尿素或0.2-0.3%的中性表面活性劑(Triton、Tween、Brij等)后過(guò)柱清洗。但需要留意的是尿素或中性表面活性劑可能會(huì)殘留在色譜柱上。
一般來(lái)說(shuō),清洗時(shí)間可選擇為過(guò)柱5-10個(gè)柱體積便可。在吸附成分其吸附力極強(qiáng)時(shí),即使進(jìn)行過(guò)清洗,色譜柱性能也有可能得不到恢復(fù)。另外,請(qǐng)充分考慮清洗液的pH值,以避免損壞色譜柱。
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