上海富衡 | 提取RNA時如何擺脫RNA酶污染?
在提取 RNA 的過程中,RNA 酶污染是一個嚴重的問題,因為 RNA 酶廣泛存在且極為穩定,很容易導致 RNA 的降解,影響后續的實驗結果。以下是一些擺脫 RNA 酶污染的有效方法。
首先,對于實驗環境要嚴格把控。提取 RNA 的操作在專門的無 RNA 酶環境中進行,如超凈工作臺。在實驗前,用專門的 RNA 酶清除劑對臺面、儀器等進行清潔和擦拭。此外,要保持實驗室的空氣清潔,避免塵埃中可能攜帶的 RNA 酶污染。
實驗所用的器具也至關重要。所有接觸 RNA 的塑料和玻璃器皿都需要特殊處理。玻璃器皿可以在 180℃烘烤至少 8 小時,以滅活可能存在的 RNA 酶。塑料耗材則應使用無 RNA 酶的產品,并且在使用前要確保包裝完整,未被污染。
在試劑方面,要使用經處理的無 RNA 酶水來配制溶液。購買的試劑要確保其質量可靠,無 RNA 酶污染。對于一些自制的緩沖液等試劑,可以加入適量的 RNA 酶抑制劑,如焦碳酸二乙酯(DEPC)。不過需要注意的是,DEPC 本身有一定毒性,使用后要保證其完全去除。
操作人員自身也是一個潛在的污染源。在操作前,要佩戴干凈的手套,并經常更換,因為手上可能存在 RNA 酶。實驗人員的頭發、皮膚等也可能攜帶 RNA 酶,因此要穿戴合適的實驗服和帽子。
在 RNA 提取過程中,動作要迅速,盡量減少 RNA 在空氣中暴露的時間。并且在整個過程中要避免交談、咳嗽等可能將 RNA 酶帶入實驗體系的行為。通過以上一系列嚴格的措施,可以有效地擺脫 RNA 酶污染,提高 RNA 提取的質量。
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