全部評論(3條)
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- 好好先生Tel 2010-01-08 00:00:00
- 看你的蛋白質要干什么用了。 如果不需要其高級結構,先將mRNA反轉錄為cDNA.再將CDNA連到相應質粒上,進行轉化。培養。。。就可以獲得相應蛋白。 如果對高級結構有要求,可以將受體細胞(大腸桿菌)變為CHO細胞(真核)等
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- a340244226 2010-01-07 00:00:00
- 采用 真核模式生物比如酵母 作為你的cDNA的受體細胞. 具體方法 參考樓上“毛多小五郎”的基因工程操作 和其原理。 (大多數情況下,在原核生物作為受體時候,可以翻譯出真核生物mRNA對應的正確的一級序列(肽鏈),但由于缺少合適的蛋白折疊的分子伴侶,這個一級結構的東西 不會有正確的高級結構,因此不會有活性。)
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- sijie199396 2010-01-07 00:00:00
- 這活必須得在細胞內完成。 根據mRNA序列合成一段雙鏈DNA,在PCR擴增儀里面擴增,然后把DNA結合到運載體上,把運載體導入受體細胞,檢測出成功導入的細胞,再把該細胞復制,然后就可以收集產物了。
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