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- 漢共操耗侄障說 2017-04-10 00:00:00
- 大家幫忙看看DNA擴增后電泳為什么是這樣子 縮短暴光時間本來就使帶變暗，如果再進一步縮短暴光時間，可能其他的帶也不清楚了。還是考慮電泳體系的問題： 1.首先考慮是你的電壓可能有點高，降低電壓后適當延長時間可以改善。 2.膠灌的如何，MARKER好象有點變形 3.加樣問題 建議用本次的樣品重新跑個看看，排除一下電泳體系的問題。 相關熱詞：電泳結果圖 擴增產物 目的基因 RT-PCR 基因 云霧狀 電泳圖 .......... 相關文章 1.請幫分析RT-PCR電泳結果圖(RT-PCR，電泳結果圖，擴增產物，目的基因) 2.請大家幫忙看張PCR電泳結果圖，謝謝！(電泳結果圖|內參) 3.誘變引物是什么啊(引物，誘變，基因，反應體系) 4.擴增產物大小不對的問題(擴增產物，細胞株，條帶) 5.三段PCR擴增產物酶切后直接連接，可行嗎(酶切，擴增產物，載體) 6.熒光定量PCR的擴增產物長度為何不能太長(擴增產物，熒光定量) 7.求RealTime PCR 內參引物序列GAPDH或Actin(內參引物序列，擴增曲線，溶解曲線，引物序列) 8.RT-QPCR大家都用什么做標準曲線(標準曲線，擴增效率，標準品，反轉錄) 9.pcr-sscp法(pcr-sscp，凝膠，單鏈，玻璃) 10.【心得】Primer3中幾個參數設置問題(參數設置，引物，互補性，設計引物)
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- 大家幫忙看看DNA擴增后電泳為什么是這樣子
2017-04-09 20:29:48
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2017-02-26 05:55:37
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- 大家幫忙看看，空空調右側黑乎乎的是什么，怎么修，謝謝！
2016-07-22 18:35:29
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- PCR擴增得到的DNA序列長度是為什么固定的
2016-03-14 22:54:03
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- PCR擴增得到的DNA序列長度是為什么固定的?
2012-05-22 03:01:09
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- DNA電泳常見問題分析
一、DNA帶模糊
原因：
1.DNA降解；
2.電泳緩沖液陳舊；
3.所用電泳條件不合適；
4.DNA上樣量過多；
5.DNA樣含鹽過高；
6.有蛋白污染；
7.DNA變性。
解決辦法：
1.避免核酸酶污染；
2.電泳緩沖液多次使用后，離子強度降低，pH值上升，緩沖能力減弱，從而影響電泳效果。建議經常更換電泳緩沖液；
3.電泳時電壓不應超過20V/cm，溫度<30℃;巨大DNA鏈電泳，溫度應<15℃;核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力；
4.減少凝膠中DNA上樣量；
5.電泳前通過乙醇沉淀去除過多的鹽；
6.電泳前酚抽提去除蛋白；
7.電泳前勿加熱，用20mM NaCI緩沖液稀釋DNA。
二、帶弱或無DNA帶
原因：
1.DNA的上樣量不夠；
2.DNA降解；
3.DNA走出凝膠；
4.對于EB染色的DNA，所用光源不合適。
解決辦法：
1.增加DNA的上樣量；聚丙烯酰胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高，上樣量可適當降低；
2.避免DNA的核酸酶污染；
3.縮短電泳時間，降低電壓，增強凝膠濃度；
4.應用短波長（254nm）的紫外光源。
三、DNA帶缺失
原因：
1.小DNA帶走出凝膠；
2.分子大小相近的DNA帶不易分辨；
3.DNA 變性；
4.DNA鏈巨大，常規凝膠電泳不合適。
解決辦法：
1.縮短電泳時間，降低電壓，增強凝膠濃度；
2.增加電泳時間，核準正確的凝膠濃度；
3.電泳前請勿高溫加熱DNA鏈，以20mM NaCl Buffer稀釋DNA；
4.在脈沖凝膠電泳上分析。
2020-09-02 16:49:09
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滬公網安備 31011502008050號
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