什么是可溶性蛋白質?測定它的含量跟植物鹽脅迫有什么關系
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高鹽度是影響植物生長發育的主要環境壓力(干旱、鹽度、高溫)之一。在對高鹽度的響應中,植物會同時經歷滲透脅迫和離子脅迫,表現為Ca2+和活性氧(ROS)的快速積累,以及蛋白質磷酸化。
蛋白質磷酸化,尤其是絲氨酸/蘇氨酸和酪氨酸的磷酸化,在植物生長和發育過程中的信號傳導,以及植物對生物或非生物脅迫響應中起著重要作用。
河北師范大學孫玉課題組在植物學期刊《Plant, Cell & Environment》上發表了題為“AtPFA-DSP3, an atypical dual-specificity protein tyrosine phosphatase, affects salt stress response by modulating MPK3 and MPK6 activity”的研究論文。該課題組以模式植物擬南芥為對象,研究了一種非典型的雙特異性酪氨酸蛋白磷酸酶——AtPFA-DSP3 (DSP3)與蛋白激酶MPK3/MPK6的互作,以及對擬南芥鹽脅迫響應的影響。
研究發現,DSP3可以與蛋白激酶MPK3/MPK6發生互作并使其去磷酸化。在高鹽度條件下,DSP3功能喪失突變體對鹽響應的敏感性降低,表現為種子萌發率、存活率和葉綠素含量升高(相較于野生型);相反,突變體的離子滲透率和ROS含量則降低(相較于野生型)。以上說明在擬南芥鹽脅迫響應過程中,DSP3起負調控作用。
其中,DSP3與MPK3/MPK6的互作通過熒光素酶(Luciferase)在本氏煙草中的表達得到了驗證,生物發光成像在VILBER多功能活體成像系統Fusion FX7上完成。
VILBER Fusion FX7多功能成像系統
產品特點:
· 采用新一代深度制冷的CCD相機,暗電流0.0001e/p/s@-90℃, 制冷速度更快且壽命更長;
· F0.7超級鏡頭,大大提高了單位時間內的進光量,從而有效縮短曝光時間,尤其適用于Luc報告基因檢測的生物發光成像;
· 熒光成像采用脈沖LED光源,7通道,激發強度比鹵素燈更高。基于掃描方式,激發均一性≥99%;
· 全自動控制7位發射濾光片輪,搭載6個專用窄波濾光片,涵蓋400~900nm,滿足多種染料的檢測需求
應用范圍:
· 小動物成像:基于生物發光或熒光的腫瘤發育、藥物代謝、細胞遷移追蹤、納米材料研究等;
· 植物成像:LUC 或GFP、RFP等報告基因檢測,轉基因鑒定、基因互作、微生物侵染、植物發育、植物生物節律等;
· 化學發光 & 熒光Western blot,Northern blot或Southern blot;
· 免染膠,銀染&考染蛋白膠,SSCP膠,培養皿(細胞或菌落),微孔板,蛋白芯片或其他基于熒光或化學發光的樣品。
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