求昆蟲干樣品DNA提取方法
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由于樣品擱置時間較長,降解得很嚴重,有沒有什么方法可以減輕降解? 就是在一般的實驗室里,沒有試劑盒什么的。
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- 一只小鳥5711 2011-03-09 00:00:00
- DNA樣本如存放時間過長,都會有不同程度的降解,這個比較正常。如果降解比較厲害,則說明樣本里含有DNA酶活性。對于已降解樣品,沒有什么太好的辦法,我能說的就是把它們扔掉不要用了,耽誤時間。 對于即將提取的樣本,有如下幾點建議。1. 提取DNA時一定要加蛋白酶protease以及硫氰酸胍Guanidinium thiocyanate 使樣本中的蛋白質失活。2. 萃取DNA時一定要將蛋白質全部分離。3. 樣本置于-20°存放。4. 切記任何試劑盒提取的DNA都沒有傳統芬-氯仿法所提取的DNA純度高,所以若想收獲高質量DNA樣本,請不要使用任何試劑盒,而用傳統方法提取。
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一些樣品易和濕分散劑起反應,比如可能溶解或和液體接觸時膨脹,所以只能在干燥狀態下測量。
另一考慮問題就是物質在干燥狀態能否自由流動,良好的表現為不粘連干燥粉狀樣品,可以在進料器中充分分解,而高粘性物質卻易粘結,使測量出現偏差。
樣品結塊只需要在烘箱中干燥一下即可。但精細的物質在烘箱中干燥時,樣品會受到破壞,為了去潮,應將烘箱調到*溫度,但不要高于樣品熔點。
如果烘箱對樣品有明顯影響,可用干燥器。沒有在空氣中受潮的新樣品是很好用的,常有很好的效果。吸潮樣品應將樣品盡快封裝入袋,以免吸潮。
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一些樣品易和濕分散劑起反應,比如可能溶解或和液體接觸時膨脹,所以只能在干燥狀態下測量。
另一考慮問題就是物質在干燥狀態能否自由流動,良好的表現為不粘連干燥粉狀樣品,可以在進料器中充分分解,而高粘性物質卻易粘結,使測量出現偏差。
樣品結塊只需要在烘箱中干燥一下即可。但精細的物質在烘箱中干燥時,樣品會受到破壞,為了去潮,應將烘箱調到*溫度,但不要高于樣品熔點。
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