
- 2025-01-10 10:50:04快速組織破碎儀
- 快速組織破碎儀是一種實驗室常用設(shè)備,主要用于快速、高效地破碎、勻漿生物組織樣本,如動植物組織、細胞等。它通過高速旋轉(zhuǎn)的刀片或研磨球產(chǎn)生強大的剪切力和沖擊力,將樣本破碎至微小顆粒,便于后續(xù)提取、分離和分析。該儀器廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、病理學(xué)等領(lǐng)域,具有操作簡便、破碎效率高、樣本處理量大等優(yōu)點。選擇時需注意其破碎效果、樣本適應(yīng)性及耐用性等性能參數(shù)。
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快速組織破碎儀問答
- 2025-01-17 12:00:16蛋白快速轉(zhuǎn)印儀怎么使用?
- 蛋白快速轉(zhuǎn)印儀怎么使用:科學(xué)高效的蛋白轉(zhuǎn)印技術(shù) 蛋白快速轉(zhuǎn)印儀是一種用于蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域中的先進實驗設(shè)備,廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、免疫學(xué)和細胞生物學(xué)等實驗室中,尤其在蛋白質(zhì)分析和檢測中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印技術(shù),尤其是Western blotting(西方印跡法),是檢測和分析特定蛋白質(zhì)的重要工具。隨著科研需求的不斷提升,蛋白快速轉(zhuǎn)印儀應(yīng)運而生,成為了提高實驗效率和準(zhǔn)確性的關(guān)鍵設(shè)備。本篇文章將詳細介紹蛋白快速轉(zhuǎn)印儀的使用方法和注意事項,幫助科研人員更好地掌握這一設(shè)備的操作技巧,提升實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。 一、蛋白快速轉(zhuǎn)印儀的工作原理 蛋白快速轉(zhuǎn)印儀主要通過電場將凝膠中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到固體支持物(如PVDF膜或硝酸纖維膜)上,借助電泳原理,使蛋白質(zhì)在電場作用下從凝膠上遷移到膜上。這一過程通常需要較長時間,但隨著科技的進步,現(xiàn)代的蛋白快速轉(zhuǎn)印儀能夠大大縮短轉(zhuǎn)印時間,提高實驗效率。其核心優(yōu)勢在于通過優(yōu)化電場條件和設(shè)計,使得轉(zhuǎn)印過程在較短的時間內(nèi)完成,同時確保蛋白質(zhì)的完整性和轉(zhuǎn)印效果。 二、蛋白快速轉(zhuǎn)印儀的操作步驟 準(zhǔn)備樣品和凝膠 在使用蛋白快速轉(zhuǎn)印儀前,首先需要確保實驗樣品已進行電泳分離,并通過凝膠進行蛋白質(zhì)分離。常用的凝膠包括SDS-PAGE凝膠,它能有效地將蛋白質(zhì)根據(jù)分子大小進行分離。 準(zhǔn)備轉(zhuǎn)印膜 選擇適合的轉(zhuǎn)印膜(通常是PVDF膜或硝酸纖維膜)。將轉(zhuǎn)印膜提前用甲醇或乙醇處理,激活其表面。然后,將膜浸泡在轉(zhuǎn)印緩沖液中,確保其潤濕。 組裝轉(zhuǎn)印設(shè)備 將凝膠、轉(zhuǎn)印膜和多層濾紙放置在轉(zhuǎn)印裝置中。濾紙可幫助吸收多余的緩沖液,同時保證膜表面與凝膠的緊密接觸,確保蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印的效率。 設(shè)定轉(zhuǎn)印參數(shù) 根據(jù)不同的實驗要求設(shè)置轉(zhuǎn)印儀的電壓、電流和時間參數(shù)。通常,快速轉(zhuǎn)印儀通過提高電壓和電流密度,縮短轉(zhuǎn)印時間,但仍保證蛋白質(zhì)的高效轉(zhuǎn)移。 啟動轉(zhuǎn)印過程 啟動設(shè)備后,蛋白質(zhì)將在電場作用下從凝膠上遷移到膜上。整個過程可在10-30分鐘內(nèi)完成,具體時間根據(jù)儀器類型、轉(zhuǎn)印膜和電泳條件而有所不同。 檢查轉(zhuǎn)印效果 轉(zhuǎn)印完成后,通過染色或免疫檢測等方法檢查膜上是否成功轉(zhuǎn)印目標(biāo)蛋白。通常,使用Ponceau S染色液可快速驗證轉(zhuǎn)印效果。 三、蛋白快速轉(zhuǎn)印儀使用中的注意事項 選擇適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)印膜 根據(jù)蛋白質(zhì)的性質(zhì)和實驗需求,選擇合適的轉(zhuǎn)印膜。PVDF膜對較小分子量的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印效果較好,而硝酸纖維膜則適用于大分子量蛋白質(zhì)。 合理設(shè)定轉(zhuǎn)印條件 不同的實驗需要不同的電壓、電流和轉(zhuǎn)印時間,過高的電壓可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)降解或轉(zhuǎn)印不完全,過長的時間則可能導(dǎo)致非特異性背景增加。因此,設(shè)定合適的轉(zhuǎn)印參數(shù)至關(guān)重要。 保證電泳分離的質(zhì)量 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印的效果直接與前期的電泳分離質(zhì)量相關(guān)。確保電泳過程中的蛋白質(zhì)能夠得到充分分離,有助于提高轉(zhuǎn)印的準(zhǔn)確性和分辨率。 優(yōu)化轉(zhuǎn)印緩沖液 轉(zhuǎn)印緩沖液的組成對轉(zhuǎn)印效果有重要影響。確保使用新鮮配制的轉(zhuǎn)印緩沖液,并根據(jù)實際需求調(diào)整緩沖液的pH值和離子強度,以獲得佳的轉(zhuǎn)印效果。 保持設(shè)備清潔 每次實驗后,清潔蛋白快速轉(zhuǎn)印儀的各個部件,特別是電極和電泳槽,以避免樣品污染和影響后續(xù)實驗的準(zhǔn)確性。 四、總結(jié) 蛋白快速轉(zhuǎn)印儀作為現(xiàn)代分子生物學(xué)實驗中的重要設(shè)備,不僅顯著提升了實驗效率,還保證了蛋白質(zhì)分析的準(zhǔn)確性。通過科學(xué)合理的操作流程和優(yōu)化的設(shè)備性能,科研人員可以在更短的時間內(nèi)完成高效的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印,為后續(xù)的蛋白質(zhì)檢測和分析打下堅實的基礎(chǔ)。熟練掌握蛋白快速轉(zhuǎn)印儀的使用技巧,不僅能提高實驗成功率,還能幫助研究人員在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中獲得更多精確的數(shù)據(jù),為科學(xué)探索提供有力支持。
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- 2021-06-04 17:59:34凈信基礎(chǔ)款組織破碎儀|大鼠心臟的研磨
- 實驗?zāi)康模貉心ゴ笫笮呐K以便提取蛋白和核酸 實驗地點:溫州醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生管理學(xué)院 實驗材料和器具: 樣品:大鼠心臟 儀器:上海凈信Tiss-Basic-24 配件:金屬適配器、鋼珠、鋼珠 實驗步驟: 1、將整塊的大鼠心臟處理成0.5mg大小以備研磨; 2、將樣品加入到無酶離心管中; 3.、加入鋼珠; 4、設(shè)定運行參數(shù); 5、啟動儀器至研磨程序結(jié)束,可得到如圖所示樣品。 實驗結(jié)果: 儀器介紹:上海凈信基礎(chǔ)款組織破碎儀Tiss-Basic-24 該儀器是一種特殊的、快速的、GX率的、多試管的一致系統(tǒng)。研磨球在研磨儀內(nèi)來回高速撞擊及摩擦,在非常短的時間內(nèi)便可完成樣品的研磨、粉碎、混合及細胞破壁。在生命科學(xué)、醫(yī)藥、生化、環(huán)境、地質(zhì)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、質(zhì)檢、成分檢測、材料等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。 優(yōu)點: 采用垂直振蕩方式,研磨更充分,穩(wěn)定性更好 同一組織樣本設(shè)定相同程序,獲得相同的研磨效果 內(nèi)置程序控制器,可對參數(shù)進行設(shè)置 在研磨過程中處于全封閉狀態(tài),避免交叉污染 具有升級成超低溫液氮冷凍或空氣制冷機制冷的能力 可研磨樣品: 1.植物組織:根、莖、葉、花、果、種子等 2.動物組織:大腦、心臟、肺、胃、肝臟、胸腺、腎臟、腸、淋巴結(jié)、肌肉、骨骼等 3.真菌細菌:酵母、大腸桿菌等 4.食品藥品:各類食品、藥片等 5.易揮發(fā)樣品:煤炭、油頁巖、蠟制品等 6.塑料、聚合物:PE、PS、紡織品、樹脂等
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- 2022-11-25 11:20:303D組織成像:快速預(yù)覽到高分辨率成像的一鍵切換
- 全場景顯微成像分析平臺MICA集3D采集和AI定量于一體。3D組織成像廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域。研究人員利用它來揭示組織組成和完整性的詳細信息,或從實驗操作中得出結(jié)論,或比較健康與不健康的樣本。本文介紹了MICA如何幫助研究人員進行3D組織成像。3D組織成像模式生物或患者的組織切片可用于分析從組織到細胞的各種形態(tài),進而發(fā)現(xiàn)健康和非健康樣本以及對照樣品和實驗樣品之間的差異。例如,是否存在特定細胞或它們的形態(tài)(即形狀、體積、長度、面積)都是有意義的參數(shù)。熒光顯微鏡有助于識別特定標(biāo)記的細胞或細胞組分。因此,要么用轉(zhuǎn)熒光標(biāo)記基因生物,要么用免疫熒光染色。此外,某些基因和轉(zhuǎn)錄也可以通過熒光原位雜交 (Fluorescence in Situ Hybridization, FISH) 進行可視化。3D組織成像的一個示例是,對腦部神經(jīng)元進行成像,以確定它們的長度、體積或與其它細胞的連接。例如,可以對患有局部腦缺血的模式生物制作腦部切片,以了解形態(tài)差異和細胞數(shù)量。挑 戰(zhàn)首要的挑戰(zhàn)之一是使用顯微鏡初步觀察樣本。需要將樣本置于載物臺上并不斷調(diào)整三維位置以確保對樣本進行正確成像。你從目鏡或屏幕上看到的只是樣本極小的一部分。因此,要將樣本保持在正確的焦距內(nèi)并找到正確位置,以便找到感興趣的區(qū)域,是一個非常麻煩的過程。MICA的樣本查找功能通過將樣本聚焦并生成每個相關(guān)區(qū)域的低倍率預(yù)覽圖來自動化這個過程,這個功能可以用于整個成像過程的定位。下一個挑戰(zhàn)是設(shè)置成像參數(shù),因此可以在看到感興趣的信號下,避免樣本遭受不必要的光漂白。這一步驟通常要同時選擇激發(fā)和接受檢測的技術(shù)參數(shù),因為每一項參數(shù)都會對樣本和獲得的結(jié)果產(chǎn)生不同的影響。使用MICA,您只需輕輕點擊一下“Live”,便可自動完成可視化熒光所需的所有參數(shù)設(shè)置。可隨時通過點擊“OneTouch”執(zhí)行這一自動化設(shè)置來優(yōu)化當(dāng)前視圖的參數(shù)。更改顯微鏡的特定技術(shù)參數(shù)前,實驗人員通常需要了解更改參數(shù)將產(chǎn)生的影響,但在MICA中,設(shè)置是輸出驅(qū)動型的,也就是說,可定義所需的輸出,然后自動完成對應(yīng)的調(diào)整。一般而言,第 一步是確定要成像的正確位置。實驗人員需要使用目鏡了解樣本的整體概況,并記住不同的位置。數(shù)字顯微鏡可以生成樣本的概覽,這可以提供一些幫助,但實驗人員仍然需要指出圖像中要進一步成像的位置。MICA的Navigator工具可簡化這一過程。用戶可以生成低倍或高倍的預(yù)覽,輕松定位感興趣的區(qū)域,并可以使用工具直接在圖像上標(biāo)記出感興趣的樣本區(qū)域。這樣后續(xù)高分辨率圖片就可以保存下來。高放大倍數(shù)物鏡通常需要使用浸沒式介質(zhì),最 常見的是水和油。水為水溶液中的成像樣品匹配了最 佳的光學(xué)指數(shù),而油為包埋的成像樣品匹配了最 佳的光學(xué)指數(shù)。水浸物鏡也可用于固定式樣本,但會稍微影響成像質(zhì)量。MICA可同時滿足兩種需求。水鏡還具有全自動化操作的額外優(yōu)勢,水的浸入可以自動建立并維持。為進一步提高光學(xué)質(zhì)量,一些物鏡會通過校正環(huán)來補償樣本板的厚度。校正環(huán)可手動、也可自動操作。MICA配置了自動校正環(huán)功能,可實現(xiàn)自動優(yōu)化。相對厚度是組織切片成像的另一大挑戰(zhàn)。厚切片會形成較多的散射光,干擾所需信號。THUNDER可減少背景模糊,為組織成像提供了一種寶貴的計算成像方法。 MICA集THUNDER于一體,可在合理的時間范圍內(nèi)確定感興趣的區(qū)域。除了類似于THUNDER的計算清除方法,共聚焦激光掃描顯微術(shù)(CLSM)等光學(xué)部分也是3D組織玻片成像的一種方法。這種方法中,可獲得性和可用性方面也是挑戰(zhàn)。除了技術(shù)設(shè)置比較復(fù)雜,共聚焦顯微鏡所需的培訓(xùn)時間一般也更長。MICA集共聚焦和寬場成像于一體,最 大程度減少了成像參數(shù)設(shè)置,縮短了所需的培訓(xùn)時間,同時也降低了操作顯微鏡的技能要求。另外,共聚焦和寬場成像模式的圖像設(shè)置有相同的外觀和使用感受,因此,用戶無需學(xué)習(xí)兩種系統(tǒng)的操作方法。而且,用戶可隨意在寬場和共聚焦兩種模式間切換而無需在兩種成像系統(tǒng)間轉(zhuǎn)移樣本。科學(xué)實驗的一個關(guān)鍵方面是,改變盡可能少的變量,以確定對樣本和結(jié)果的任何影響。除了保證樣本處理相同外,另一個方面是針對激發(fā)和接收檢測成像參數(shù)相同。MICA默認在不同項目中保持成像參數(shù)不變,用戶僅基于自己的需求進行調(diào)整。可根據(jù)參考圖像輕松恢復(fù)成像參數(shù)。方法三個厚度為250μm的小鼠腦部切片包含下述熒光標(biāo)記物:細胞核(DAPI,品紅色)神經(jīng)元(細胞質(zhì)GFP,青色)星形膠質(zhì)細胞(GFAP-DsRed,紅色)將切片固定于載玻片支架中(圖1)并置于載物臺上進行成像。圖1:用于玻片成像的MICA玻片夾,例如組織切片。在樣本定義中輸入蓋玻片類型和染料等基本信息。利用這一信息,Sample Finder可以識別蓋玻片并自動生成低倍的預(yù)覽。對整個蓋玻片的預(yù)覽可以用來識別三個組織切片,然后用Navigator工具進行標(biāo)記。隨后無需手動調(diào)整成像參數(shù),便可以在20倍寬場模式下對標(biāo)記區(qū)域生成掃描拼接圖像。在這個放大倍數(shù)和分辨率下,就能在組織切片上識別出感興趣的區(qū)域,然后用共聚焦顯微鏡成像。此時,MICA會在相關(guān)區(qū)域切換為共聚焦模式,記錄高清晰圖像,包括三維立體圖像。定義三維立體圖像時,可以手動或單擊鼠標(biāo)自動設(shè)置限制。z Range Finder工具自動確定3D圖像掃描開始和結(jié)束部分。成像后,可借助MICA Learn & Results工具測量樹突棘。為此,使用pixel classifier在疊層投影下識別棘突。pixel classifier簡單易用且功能強大,用戶只需使用類似于繪畫工具的繪圖工具標(biāo)記對象的示例,在這種情況下為棘突。通過訓(xùn)練模型,更好地再現(xiàn)輸入,然后提供圖像中其他對象的預(yù)覽。經(jīng)過訓(xùn)練后,就可使用模型分析圖像。 結(jié)果找到載玻片預(yù)覽上單個腦部切片,然后使用Magic Wand工具進行標(biāo)記以進行掃描拼接。Magic Wand自動識別組織切片的邊界并相應(yīng)地定義所需的拼接。圖2:MICA在實驗開始時進行完整的玻片預(yù)覽(寬場),便于更輕松地定位。借助該信息的信息,可找到大圖掃描拼接的感興趣區(qū)域。可使用Magic Wand工具自動化檢測感興趣區(qū)域。MICA可同時采集最 多四個熒光團,因此相比基于濾光塊的序列成像的顯微系統(tǒng),可有效節(jié)約用戶的時間。在單次掃描拼接中,可找到感興趣區(qū)域,并在共聚焦模式下以更高的放大倍數(shù)觀察更多的細節(jié)。二維圖像需要借助三維數(shù)據(jù)以獲得更詳細的信息。為此,z界面中定義了三維立體模式。在CLSM下進行立體采集后(120μm厚),可在三維觀察器中可視化數(shù)據(jù),獲得腦部樣本的更多空間信息。圖3:三維重構(gòu)CLSM。通過三維采集進一步研究組織切片。利用獲得的三維信息,用戶可以更好地了解樣本的空間狀況,例如了解細胞間的連接。對于定量來說,可根據(jù)三維采集信息生成最 大投影來測量樣本樹突棘的平均面積。pixel classifier識別棘突,分析工具則確定面積。得到的數(shù)值可繪制成圖,以可視化數(shù)據(jù)和相關(guān)性。圖4顯示了樹突棘面積的直方圖。這些結(jié)果也可通過箱線圖的形式顯示,來比較不同的樹突棘群落(圖4)。圖4:分析。MICA不僅采集圖像,還可對它們進行分析。為此,可使用基于人工智能技術(shù)的pixel classifier來識別相關(guān)的圖像細節(jié)。隨后,識別出的對象可以被量化并顯示在圖形中。在本示例中,樹突棘的平均面積在最 大投影上測量。結(jié)論MICA是用于三維組織成像的有效工具:使用pixel classifier功能,用戶可以快速了解樣本的整體質(zhì)量,確定進一步的操作。隨后,Navigator視圖可對組織切片進行更深入的觀察。Magic Wand等工具用于快速定義感興趣的區(qū)域,加上4個通道的同時成像,可加快大圖掃描拼接的速度。使用新的z界面使三維采集更加簡化,pixel classifier能輔助后續(xù)分析。簡而言之,MICA集寬場成像和共聚焦成像于一個系統(tǒng)中。它可以幫助用戶在一個系統(tǒng)中完成從圖像預(yù)覽到三維細節(jié)成像再到分析的整個工作流程。參考資料:Efficient Long-term Time-lapse Microscopy, Science Lab (2022) Leica Microsystems.
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- 2022-11-09 16:39:463D組織成像:快速預(yù)覽到高分辨率成像的一鍵切換
- 全場景顯微成像分析平臺MICA集3D采集和AI定量于一體。3D組織成像廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域。研究人員利用它來揭示組織組成和完整性的詳細信息,或從實驗操作中得出結(jié)論,或比較健康與不健康的樣本。本文介紹了MICA如何幫助研究人員進行3D組織成像。3D組織成像模式生物或患者的組織切片可用于分析從組織到細胞的各種形態(tài),進而發(fā)現(xiàn)健康和非健康樣本以及對照樣品和實驗樣品之間的差異。例如,是否存在特定細胞或它們的形態(tài)(即形狀、體積、長度、面積)都是有意義的參數(shù)。熒光顯微鏡有助于識別特定標(biāo)記的細胞或細胞成分。因此,要么用轉(zhuǎn)熒光標(biāo)記基因生物,要么用免疫熒光染色。此外,某些基因和轉(zhuǎn)錄也可以通過熒光原位雜交 (Fluorescence in Situ Hybridization, FISH) 進行可視化。3D組織成像的一個示例是,對腦部神經(jīng)元進行成像,以確定它們的長度、體積或與其它細胞的連接。例如,可以對患有局部腦缺血的模式生物制作腦部切片,以了解形態(tài)差異和細胞數(shù)量。挑戰(zhàn)首要的挑戰(zhàn)之一是使用顯微鏡初步觀察樣本。需要將樣本置于載物臺上并不斷調(diào)整三維位置以確保對樣本進行正確成像。你從目鏡或屏幕上看到的只是樣本極小的一部分。因此,要將樣本保持在正確的焦距內(nèi)并找到正確位置,以便找到感興趣的區(qū)域,是一個非常麻煩的過程。MICA的樣本查找功能通過將樣本聚焦并生成每個相關(guān)區(qū)域的低倍率預(yù)覽圖來自動化這個過程,這個功能可以用于整個成像過程的定位。下一個挑戰(zhàn)是設(shè)置成像參數(shù),因此可以在看到感興趣的信號下,避免樣本遭受不必要的光漂白。這一步驟通常要同時選擇激發(fā)和接受檢測的技術(shù)參數(shù),因為每一項參數(shù)都會對樣本和獲得的結(jié)果產(chǎn)生不同的影響。使用MICA,您只需輕輕點擊一下“Live”,便可自動完成可視化熒光所需的所有參數(shù)設(shè)置。可隨時通過點擊“OneTouch”執(zhí)行這一自動化設(shè)置來優(yōu)化當(dāng)前視圖的參數(shù)。更改顯微鏡的特定技術(shù)參數(shù)前,實驗人員通常需要了解更改參數(shù)將產(chǎn)生的影響,但在MICA中,設(shè)置是輸出驅(qū)動型的,也就是說,可定義所需的輸出,然后自動完成對應(yīng)的調(diào)整。一般而言,第一步是確定要成像的正確位置。實驗人員需要使用目鏡了解樣本的整體概況,并記住不同的位置。數(shù)字顯微鏡可以生成樣本的概覽,這可以提供一些幫助,但實驗人員仍然需要指出圖像中要進一步成像的位置。MICA的Navigator工具可簡化這一過程。用戶可以生成低倍或高倍的預(yù)覽,輕松定位感興趣的區(qū)域,并可以使用工具直接在圖像上標(biāo)記出感興趣的樣本區(qū)域。這樣后續(xù)高分辨率圖片就可以保存下來。高放大倍數(shù)物鏡通常需要使用浸沒式介質(zhì),最常見的是水和油。水為水溶液中的成像樣品匹配了最佳的光學(xué)指數(shù),而油為包埋的成像樣品匹配了最佳的光學(xué)指數(shù)。水浸物鏡也可用于固定式樣本,但會稍微影響成像質(zhì)量。MICA可同時滿足兩種需求。水鏡還具有全自動化操作的額外優(yōu)勢,水的浸入可以自動建立并維持。為進一步提高光學(xué)質(zhì)量,一些物鏡會通過校正環(huán)來補償樣本板的厚度。校正環(huán)可手動、也可自動操作。MICA配置了自動校正環(huán)功能,可實現(xiàn)自動優(yōu)化。相對厚度是組織切片成像的另一大挑戰(zhàn)。厚切片會形成較多的散射光,干擾所需信號。THUNDER可減少背景模糊,為組織成像提供了一種寶貴的計算成像方法。 MICA集THUNDER于一體,可在合理的時間范圍內(nèi)確定感興趣的區(qū)域,除了類似于THUNDER的計算清除方法,共聚焦激光掃描顯微術(shù)(CLSM)等光學(xué)部分也是3D組織玻片成像的一種方法。這種方法中,可獲得性和可用性方面也是挑戰(zhàn)。除了技術(shù)設(shè)置比較復(fù)雜,共聚焦顯微鏡所需的培訓(xùn)時間一般也更長。MICA集共聚焦和寬場成像于一體,最大程度減少了成像參數(shù)設(shè)置,縮短了所需的培訓(xùn)時間,同時也降低了操作顯微鏡的技能要求。另外,共聚焦和寬場成像模式的圖像設(shè)置有相同的外觀和使用感受,因此,用戶無需學(xué)習(xí)兩種系統(tǒng)的操作方法。而且,用戶可隨意在寬場和共聚焦兩種模式間切換而無需在兩種成像系統(tǒng)間轉(zhuǎn)移樣本。科學(xué)實驗的一個關(guān)鍵方面是,改變盡可能少的變量,以確定對樣本和結(jié)果的任何影響。除了保證樣本處理相同外,另一個方面是針對激發(fā)和接收檢測成像參數(shù)相同。MICA默認在不同項目中保持成像參數(shù)不變,用戶僅基于自己的需求進行調(diào)整。可根據(jù)參考圖像輕松恢復(fù)成像參數(shù)。方法三個厚度為250μm的小鼠腦部切片包含下述熒光標(biāo)記物:· 細胞核(DAPI,品紅色)· 神經(jīng)元(細胞質(zhì)GFP,青色)· 星形膠質(zhì)細胞(GFAP-DsRed,紅色)將切片固定于載玻片支架中(圖1)并置于載物臺上進行成像。圖2: MICA在實驗開始時進行完整的玻片預(yù)覽(寬場),便于更輕松地定位。借助該信息的信息,可找到大圖掃描拼接的感興趣區(qū)域。可使用Magic Wand工具自動化檢測感興趣區(qū)域。MICA可同時采集最多四個熒光團,因此相比基于濾光塊的序列成像的顯微系統(tǒng),可有效節(jié)約用戶的時間。在單次掃描拼接中,可找到感興趣區(qū)域,并在共聚焦模式下以更高的放大倍數(shù)觀察更多的細節(jié)。二維圖像需要借助三維數(shù)據(jù)以獲得更詳細的信息。為此,z界面中定義了三維立體模式。在CLSM下進行立體采集后(120μm厚),可在三維觀察器中可視化數(shù)據(jù),獲得腦部樣本的更多空間信息。 圖3:三維重構(gòu)CLSM。通過三維采集進一步研究組織切片。利用獲得的三維信息,用戶可以更好地了解樣本的空間狀況,例如了解細胞間的連接。對于定量來說,可根據(jù)三維采集信息生成最大投影來測量樣本樹突棘的平均面積。pixel classifier識別棘突,分析工具則確定面積。得到的數(shù)值可繪制成圖,以可視化數(shù)據(jù)和相關(guān)性。圖4顯示了樹突棘面積的直方圖。這些結(jié)果也可通過箱線圖的形式顯示,來比較不同的樹突棘群落(圖4)。圖4:分析。MICA不僅采集圖像,還可對它們進行分析。為此,可使用基于人工智能技術(shù)的pixel classifier來識別相關(guān)的圖像細節(jié)。隨后,識別出的對象可以被量化并顯示在圖形中。在本示例中,樹突棘的平均面積在最大投影上測量。結(jié)論MICA是用于三維組織成像的有效工具:使用pixel classifier功能,用戶可以快速了解樣本的整體質(zhì)量,確定進一步的操作。隨后,Navigator視圖可對組織切片進行更深入的觀察。Magic Wand等工具用于快速定義感興趣的區(qū)域,加上4個通道的同時成像,可加快大圖掃描拼接的速度。使用新的z界面使三維采集更加簡化,pixel classifier能輔助后續(xù)分析。簡而言之,MICA集寬場成像和共聚焦成像于一個系統(tǒng)中。它可以幫助用戶在一個系統(tǒng)中完成從圖像預(yù)覽到三維細節(jié)成像再到分析的整個工作流程。
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- 2022-09-22 15:38:26多功能快速消解儀如何正確購買?
- 消解作為一種智能的樣品前處理方法,能夠很好的滿足現(xiàn)代儀器分析對樣品前處理過程的要求,具備加熱速度快、加熱均勻、試劑用量少、低空白、節(jié)能高效等優(yōu)點。尤其在易揮發(fā)元素的分析檢測中可以很好的保持樣品完整性,具備很高的樣品回收率。那么,怎樣避免消費者購買到故障率高的多功能快速消解儀呢?1、口碑從同行業(yè)中了解廠商的口碑效應(yīng),包括機器品質(zhì)與維修服務(wù)能力。2.考察如果條件允許,可以到儀器廠商生產(chǎn)車間或廠商已有用戶中參觀考察;也可以參觀行業(yè)展會,在展會中體驗和試用儀器。3、試用可以向廠商申請試用,試用滿意后,再進行購買。
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