- 2025-01-21 09:33:29熒光標記肽、
- 熒光標記肽是一種經過特殊處理的肽類分子，其中融入了熒光基團。這種熒光基團能夠在特定波長光的激發下發出熒光，從而實現對肽分子的追蹤和可視化。熒光標記肽在生物學和醫學研究、藥物研發及蛋白質相互作用等領域有著廣泛應用。它們可以幫助研究人員觀察肽在細胞內的定位、動態變化及與其他分子的相互作用，是研究生物過程和疾病機制的重要工具。通過熒光標記，可以更加直觀、精確地解析肽的功能和作用機制。
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熒光標記肽、問答
- 2022-07-22 15:27:25熒光定量PCR實驗，熒光標記怎么選？
- 熒光定量PCR技術是將常規的PCR和熒光檢測技術相結合，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，以此實現對初始模板的定量分析。熒光定量PCR技術作為當今生物學研究的重要手段之一，在基礎科學、生物技術、醫學研究、法醫學、診斷學等多方面具有廣泛的應用前景。說到熒光定量PCR技術，我們經常會問類似于“你的實驗是染料法還是探針法”，“你用的探針是什么類型”等之類的問題，這其實是對熒光標記的選擇。根據熒光標記的不同，可以將熒光定量PCR實驗分為探針法和染料法兩大類。染料法染料法利用能與DNA雙鏈結合的染料來實現，如SYBR Green I。該染料在游離狀態下呈現微弱的熒光，一旦與雙鏈DNA的雙螺旋小溝結合，其綠色熒光增強約1000倍。因此其總的熒光強度與雙鏈DNA含量成正比，利用這一關系可以反映生成的PCR產物的量（圖 1）。SYBR Green I的吸收約在497 nm，發射波長約在520 nm，與FAM熒光分子的光譜性質類似，因此在所有的熒光定量PCR設備中都是通道檢測，即“FAM/SYBR Green I”通道。▲ 圖1 染料法原理圖理論上，所有能與雙鏈DNA結合的染料都可以用于qPCR檢測，如溴化乙錠EtBr，碘化丙啶PI，吖啶橙、Cy3等。而選擇用于qPCR反應的染料通常會從信號強度、生物安全性、檢測簡便性和經濟適用性這幾個因素考慮。例如EtBr可能存在潛在的致癌性。綜合考慮下來，SYBR Green I成了比較理想的選擇。目前，使用Evagreen的實驗者也越來越多，Evagreen作為一種新型的染料，其光譜性質與SYBR Green I類似，其優勢在于：? 對PCR反應的抑制程度小。高濃度SYBR Green I會強烈抑制PCR反應，因此要控制其使用濃度，一定程度上降低了DNA檢測的靈敏度。? 與DNA結合密度高。單位長度的DNA雙鏈上Evagreen的密度更高，為飽和型染料，消除了SYBR Green I存在的“染料重分布”的缺陷，提高檢測靈敏度的同時也可用于高分辨率溶解曲線HRM。? 化學性質更穩定，適合長期保存。TaqMan 探針TaqMan 探針基本可以滿足60%以上的qPCR實驗，如常規的基因表達和拷貝數變異CNV實驗。TaqMan 熒光探針是一種寡核苷酸探針，熒光基團連接在探針的5'末端，而淬滅劑則在3'末端（圖2）。PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收; PCR擴增時, Tag酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系統可接收到熒光信號，每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。常用的熒光基團是FAM，TET，VIC，HEX。▲ 圖2 Taqman探針MGB探針對于要分辨單堿基差異的SNP實驗，采用對堿基錯配容忍度更低的MGB探針，在淬滅基團后加入了DPI3基團（圖3），從而提高了與靶標結合的親和力；而且可以對靶點堿基進行化學修飾，如PeptideNucleic Acid和Locked Nucleic Acid。▲ 圖3 MGB探針雙雜交探針Taqman探針對探針的長度有比較嚴格的要求，雙雜交探針則消除了這一“缺陷”。雙雜交探針是由兩條寡核苷酸單鏈組成，一條的3’端帶有供體熒光分子，另一條的5’端帶有受體熒光分子（圖4）。游離狀態下熒光供體會發出熒光，但當兩條單鏈都匹配到模板鏈上時，就會發生熒光共振能量轉移FRET，受體熒光分子就可以發出熒光，其熒光強度與生成的產物的量成正比。雙雜交探針的優勢有兩點：擺脫了探針長度的限制，較長的探針可以提高與模板匹配的成功率；只有上下游兩條探針都正確匹配后才能檢測到受體熒光分子發出的熒光，特異性有所提高。▲ 圖4 雙雜交探針分子信標探針游離狀態下，分子信標探針是一種莖環結構，其環狀部分的15-30個堿基可以與靶標區域相結合匹配，下端的配對區域（左右一般各5-6個堿基）則由重復的GC組成，從而將5’的熒光分子和3’的淬滅基團緊緊聚在一起，熒光發生淬滅；當退火時，分子信標探針解開環并與模板靶標雜交，這樣熒光分子和淬滅基團的物理距離就變大了，熒光淬滅的前提就打破了（圖5）。除了MGB探針，分子信標探針也非常適合用于SNP檢測。▲ 圖5 分子信標探針除了上述幾種類型的探針之外，還有嘗試將引物和探針功能相結合的技術，如Amplifluor、LUX等，在設計難度上有所提高，但使用時更簡便。各有其應用的側重點和設計上的利弊，在此不多贅述。那么在熒光定量PCR實驗中，我們應該如何進行選擇呢？在這里，給大家總結了一些兩種方法的區別，供大家參考。表1 染料法和探針法的區別
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- 2023-05-08 19:13:14明美LED熒光光源助力顯微鏡熒光升級
- 明美LED熒光光源助力顯微鏡熒光升級熒光顯微鏡具有特異性強、檢出率高等優勢，因此在各種科研和醫學檢查應用中使用廣泛，傳統熒光顯微鏡因為汞燈光源限制，有比較多使用難點，明美針對這些問題，投入大量人力和資金，研發出了一系列LED熒光光源，助力顯微鏡熒光升級和傳統熒光顯微鏡升級LED熒光顯微鏡，取得市場廣泛認可。熒光顯微鏡的常用光源通常都是白光光源，而熒光光源有高壓汞燈，氙燈，金屬鹵素燈和LED白光光源以及LED單波長光源，光源間各有優劣勢，近期，北京用戶需要替換汞燈光源，因為汞燈壽命短，需預熱，操作繁瑣，明美北京區域工程師提供了四通道的LED熒光光源MG-120，壽命長，即開即關，操作簡單，解決的老師的使用煩惱 熒光光源MG-120采用四通道獨立控制，可選BGUR等不同通道配置，壽命長，衰減慢，通常不需要更換燈泡及校準，可以即開即用；控制方便，外部配備有控制器，能進行特定波長開關和亮度記憶，減少熒光串色及熒光淬滅。此次，用戶是搭配奧林巴斯倒置顯微鏡IX73，該熒光光源已做測試，可適配各熒光顯微鏡如果您對熒光光源感興趣或存在疑問，歡迎與我們聯系，我們將竭誠為您服務！來源：https://www.mshot.com/article/1738.html
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- 2023-06-12 14:09:33熒光生物顯微鏡應用于CTC檢測
- 級熒光生物顯微鏡MF43-M應用于CTC檢測CTC檢測不僅特異性強、靈敏度高，能更早預知判斷，還能重復取樣，快速便捷，隨時監測，在臨床診斷應用廣泛。近期，明美湖南區域安裝科研級熒光生物顯微鏡MF43-M，以用于CTC檢測及FISH檢測，整體效果獲得用戶認可。CTC檢測作為一種新型的非侵入性診斷手段，在一定程度上彌補了傳統方法的不足，有 “液體活檢”之稱，好的方法當然少不了好的工具，明美科研級熒光生物顯微鏡MF43-M配備6孔落射熒光模塊和超長壽命LED熒光光源，可擴展升級實現各種觀察方式，如明場、暗場、熒光等，高數值孔徑半復消色差物鏡成像清晰，尤其適合CTC檢測等應用。科研級熒光生物顯微鏡MF43-M已取得醫療器械注冊證，嚴格的質量把關及符合人體工程學的配件能幫您克服長期使用姿勢不舒服而導致肌肉勞損。可配套同樣擁有注冊資質的熒光原位雜交MFISH軟件，實現高質量的FISH成像。您若對熒光生物顯微鏡感興趣或存在疑問，歡迎與我們聯系，我們將竭誠為您服務！免責聲明本站無法鑒別所上傳圖片、字體或文字內容的版權，如無意中侵犯了哪個權利人的知識產權，請來信或來電告之，本站將立即予以刪除，謝謝。 來源：https://www.mshot.com/article/1761.html
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- 2023-05-26 10:20:02FluorCam-Pro植物多光譜熒光成像系統
- FluorCam-Pro植物多光譜熒光成像系統是FluorCam葉綠素熒光成像技術的最 新高級擴展產品。此系統既可用于PAM脈沖調制式葉綠素熒光動態成像分析，又可用于UV紫外光對植物葉片激發產生的多光譜熒光成像測量分析，還可選配濾波器組對GFP、RFP、YFP、SYBR Green等熒光蛋白和熒光染料進行穩態熒光成像測量。測量對象包括葉片、果實、花朵、整株擬南芥或其他小型植株、苔蘚、微藻、大型藻類乃至特定的動物樣品。應用領域：植物光合生理生態植物逆境脅迫生理與易感性植物初級代謝與次級代謝植物表型組學成像分析（Phenotyping）作物遺傳育種與抗性篩選種子萌發與活力監測轉基因植株篩選功能特點：多激發光-多光譜熒光成像技術：通過兩種以上不同波長的光源激發植物樣品中不同的發色團發出熒光并進行成像檢測，即為多激發光多光譜熒光成像技術。植物的多光譜熒光主要包括葉綠素熒光、UV紫外光激發多光譜熒光和熒光蛋白熒光FluorCam-Pro無需更換任何配件即可同步實現多激發光-多光譜熒光成像功能：PAM脈沖調制式葉綠素熒光成像紫外激發F440、F520、F690、F740多光譜熒光成像GFP、RFP、YFP等常用熒光蛋白成像可根據用戶需要定制熒光蛋白或熒光染料成像，如BFP、CFP、SYBR Green、DAPI等可對黃酮、花青素含量進行定量測量可進行自動重復成像測量和無人值守監測，可設置實驗程序（Protocols）自動循環成像測量，成像測量數據自動按時間日期存入計算機（帶時間戳）測量樣品為各種活體植物樣品，包括葉片、花卉、果實、整株擬南芥或其他小型植物、微藻（包括液滴、多孔板、固體培養基）及大型藻類等技術指標：一體式設計，自帶暗適應箱體最 佳成像面積：20×20cm測量參數：Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm', Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII, NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qL, QY, QY_Ln, Rfd, ETR等50多個葉綠素熒光參數；紫外激發多光譜熒光成像參數：F440、F520、F690、F740；熒光蛋白熒光強度參數Ft；每項參數均可顯示對應二維熒光彩色圖像。并可測量計算黃酮醇指數Flavonol Index,、花青素指數Anthocyanin Index。具備完備的自動測量程序（protocol），可自由對自動測量程序進行編輯1)Fv/Fm：測量參數包括Fo，Fm，Fv，QY等葉綠素熒光參數2)Kautsky誘導效應：Fo，Fp，Fv，Ft_Lss，QY，Rfd等葉綠素熒光參數3)Quenching熒光淬滅分析：Fo，Fm，Fp，Fs，Fv，QY，ΦII，NPQ，Qp，Rfd，qL等50多個葉綠素熒光參數4)Light Curve光響應曲線：不同光強梯度條件下Fo，Fm，QY，QY_Ln，ETR等葉綠素熒光參數5)MultiColor紫外激發多光譜熒光成像（選配）6)FPs熒光蛋白成像：GFP、YFP、RFP、BFP等（選配）熒光激發光源組：全LED光源，包括620nm紅光、5700K冷白光、735nm遠紅光、365nm紫外光，445nm品藍光，470nm藍光，505nm青光，530nm綠光，590nm琥珀色光等高分辨率CCD相機1)圖像分辨率：1360×1024像素2)時間分辨率：在最 高圖像分辨率下可達每秒20幀具備7位濾波輪，標配葉綠素熒光濾波器，根據用戶需要可定制紫外激發多光譜熒光和GFP、RFP、YFP、BFP等熒光蛋白專用濾波器FluorCam葉綠素熒光成像分析軟件功能：具Live（實況測試）、Protocols（實驗程序選擇定制）、Pre–processing（成像預處理）、Result（成像分析結果）等功能菜單自動測量分析功能：可設置一個實驗程序（Protocol）自動無人值守循環成像測量，重復次數及間隔時間客戶自定義，成像測量數據自動按時間日期存入計算機（帶時間戳）成像預處理：程序軟件可自動識別多個植物樣品或多個區域，也可手動選擇區域（Region of interest，ROI）。手動選區的形狀可以是方形、圓形、任意多邊形或扇形。軟件可自動測量分析每個樣品和選定區域的熒光動力學曲線及相應參數，樣品或區域數量不受限制（>1000）輸出結果：高時間解析度熒光動態圖、熒光動態變化視頻、熒光參數Excel文件、直方圖、不同參數成像圖、不同ROI的熒光參數列表等應用案例：1.抗病毒基因研究：葉綠素熒光成像與GFP成像聯合分析法國國家農業科學研究院一直致力于馬鈴薯y病毒組的抗病基因研究，通過不同基因編輯處理方法，驗證抗病毒分子機制。相關研究中，研究人員利用FluorCam多光譜熒光成像系統的GFP熒光蛋白成像功能，定量分析感染面積與病毒積累量，從而直觀地反映了不同基因功能對擬南芥病毒抗性的影響。同時，葉綠素熒光成像則反映病毒對光合系統的損傷，同步提供植物的光合表型信息。參考文獻：Zafirov D, et al. 2021. When a knockout is an Achilles' heel: Resistance to one potyvirus species triggers hypersusceptibility to another one in Arabidopsis thaliana. Mol Plant Pathol. 22: 334–347Bastet A, et al. 2019. Mimicking natural polymorphism in eIF4E by CRISPR‐Cas9 base editing is associated with resistance to potyviruses. Plant Biotechnology Journal 17: 1736–1750Bastet A, et al. 2018. Trans-species synthetic gene design allows resistance pyramiding and broad-spectrum engineering of virus resistance in plants. Plant Biotechnology Journal: 1–132.不同顏色凌霄葉片的葉綠素熒光與紫外激發多光譜熒光成像分析（易科泰EcoTech?實驗室）產地：歐洲
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- 2023-07-10 17:59:15熒光生物顯微鏡應用于皮屑真菌檢測
- 熒光生物顯微鏡助力前海人壽韶關醫院皮屑真菌檢測相信很多人受過腳癬、甲癬等真菌性皮膚病的困擾，藥店買點藥膏涂涂，但是卻反反復復。現在診斷不僅靠臨床表現，并且有更準確的真菌熒光生物顯微鏡檢測法，熒光生物顯微鏡MF23-M近期交付前海人壽韶關醫院，助力皮屑真菌檢測。現在的熒光真菌鏡檢檢測范圍廣，操作簡單快捷，靈敏度高，通過熒光染料與細胞壁多糖結合，從而標記真菌，在熒光生物顯微鏡下進行觀察。快速定性檢測人體組織及體液中可能存在的各類真菌。近期，明美熒光生物顯微鏡MF23-M安裝于前海人壽韶關醫院，大大提高了真菌檢出靈敏度和特異性，避免假陽性并且縮短了鏡檢時間，有利于準確診斷。熒光生物顯微鏡MF23-M采用雙LED光源,使用簡單方便，觀察清晰，拍照色彩還原度和清晰度高，采用拉桿式切換熒光通道，工程師現場安裝測試效果后，用戶表示很滿意。免責聲明本站無法鑒別所上傳圖片、字體或文字內容的版權，如無意中侵犯了哪個權利人的知識產權，請來信或來電告之，本站將立即予以刪除，謝謝。來源：https://www.mshot.com/article/1766.html
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