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2025-01-10 17:03:44流式成像細(xì)胞儀: 流式成像細(xì)胞儀是一種集流式細(xì)胞術(shù)與成像技術(shù)于一體的先進(jìn)科學(xué)儀器。它能夠在高速流動的細(xì)胞懸液中，對單個細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)、高分辨率的成像分析。通過激光激發(fā)熒光標(biāo)記，流式成像細(xì)胞儀能捕捉細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)、形態(tài)及功能特征，提供比傳統(tǒng)流式細(xì)胞術(shù)更豐富的細(xì)胞信息。該儀器廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷及藥物篩選等領(lǐng)域，助力科研人員深入了解細(xì)胞特性，推動生命科學(xué)研究的進(jìn)步。

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流式成像細(xì)胞儀資訊

流式成像細(xì)胞儀(FlowCam?)在微塑料研究中的使用

在研究期間，每隔一段時間，通過計(jì)算處理水中R. salina和MPF濃度的變化來確定每個貽貝的MPF和微藻吸收率。用FlowCam對處理水中、假糞便、糞便中的MPF進(jìn)行定量。

大昌華嘉科學(xué)儀器部 1345
2022-10-05
流式成像細(xì)胞儀

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流式成像細(xì)胞儀問答

2025-02-18 14:30:11細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)如何操作？: 細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)：革新生命科學(xué)研究的關(guān)鍵工具細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)是生命科學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)重要技術(shù)，它廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究以及藥物開發(fā)等多個領(lǐng)域。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)的功能和精度也在不斷提升，使研究人員能夠更深入地觀察細(xì)胞內(nèi)部的動態(tài)變化、結(jié)構(gòu)特征以及各種生物學(xué)過程。這些系統(tǒng)不僅幫助科學(xué)家更好地理解細(xì)胞行為，還為疾病的早期診斷和方案的制定提供了強(qiáng)有力的支持。本文將詳細(xì)介紹細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)的工作原理、應(yīng)用領(lǐng)域及其對生命科學(xué)研究的重要意義。細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)的工作原理細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)通過使用顯微技術(shù)，結(jié)合先進(jìn)的成像設(shè)備，能夠捕捉到細(xì)胞內(nèi)部和表面的細(xì)節(jié)。常見的技術(shù)包括熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡和電子顯微鏡等。熒光成像技術(shù)利用熒光染料標(biāo)記細(xì)胞中的特定分子或結(jié)構(gòu)，能夠清晰地顯示細(xì)胞的各種動態(tài)過程，如蛋白質(zhì)的表達(dá)、細(xì)胞的增殖與死亡等。共聚焦顯微鏡則通過激光掃描技術(shù)獲得高分辨率的細(xì)胞圖像，能夠在更高的放大倍率下獲得更細(xì)致的觀察結(jié)果。通過這些成像技術(shù)，細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)能夠?qū)崟r捕捉細(xì)胞在不同生理狀態(tài)下的變化。比如，研究人員可以通過成像觀察癌細(xì)胞如何在不同藥物作用下發(fā)生變化，從而幫助篩選出更具的藥物。隨著分辨率和成像速度的不斷提升，現(xiàn)代細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)能夠獲得更加精確的細(xì)胞圖像，甚至可以對活細(xì)胞進(jìn)行長時間的動態(tài)監(jiān)測。細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)的應(yīng)用領(lǐng)域細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)在多個領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用，特別是在生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中。它在細(xì)胞生物學(xué)研究中起著至關(guān)重要的作用。通過精確觀察細(xì)胞內(nèi)的分子活動，研究人員能夠揭示許多細(xì)胞內(nèi)在的生物學(xué)過程，包括蛋白質(zhì)的定位、細(xì)胞周期的調(diào)控以及細(xì)胞信號傳導(dǎo)等。通過這些研究，科學(xué)家能夠深入了解細(xì)胞的基本功能和機(jī)制。細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)在癌癥研究中的應(yīng)用也尤為突出。通過實(shí)時觀察腫瘤細(xì)胞的生長和擴(kuò)散過程，科學(xué)家能夠分析腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞的差異，進(jìn)而尋找新的靶點(diǎn)進(jìn)行。細(xì)胞成像技術(shù)還在藥物篩選中得到了重要應(yīng)用，通過成像系統(tǒng)觀察藥物對細(xì)胞的影響，幫助篩選出更具和更安全的藥物。細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)的未來發(fā)展隨著技術(shù)的不斷創(chuàng)新，細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)在未來將更加、高效。例如，隨著超分辨率成像技術(shù)的發(fā)展，研究人員將能夠觀察到比以往更細(xì)微的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，甚至可能突破傳統(tǒng)顯微技術(shù)的分辨率極限。自動化和人工智能技術(shù)的結(jié)合也將進(jìn)一步提高成像效率和分析準(zhǔn)確性，減少人工干預(yù)，使細(xì)胞成像檢測更加便捷。在疾病診斷方面，細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)的未來也充滿了無限潛力。通過結(jié)合生物標(biāo)志物和成像技術(shù)，研究人員可以實(shí)現(xiàn)更早期的疾病診斷，特別是癌癥、神經(jīng)退行性疾病等疾病的早期篩查，從而提高的成功率。結(jié)論細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)作為生命科學(xué)研究中不可或缺的工具，其在細(xì)胞生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究及藥物開發(fā)等領(lǐng)域的應(yīng)用具有重要意義。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，細(xì)胞成像系統(tǒng)的功能和應(yīng)用場景也將不斷擴(kuò)展，推動著生命科學(xué)的發(fā)展。對于未來的醫(yī)學(xué)和生物學(xué)研究，細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)必將繼續(xù)發(fā)揮著關(guān)鍵作用，成為揭示生命奧秘的重要手段。

2022-11-15 17:23:36ibidi活細(xì)胞成像|為什么要用活細(xì)胞成像來研究細(xì)胞的5大理由！: 　　細(xì)胞生物學(xué)是生命科學(xué)的一門學(xué)科。顧名思義，它致力于研究生物。單憑這一事實(shí)就足以成為研究細(xì)胞自然生存狀態(tài)的理由。當(dāng)然，活細(xì)胞成像還有其他深層次的原因。在本篇文章中，我們列舉了用延時顯微鏡研究活細(xì)胞是有意義的五大很好的理由。　　　　背景　　　　活細(xì)胞成像允許在一定時間內(nèi)在顯微鏡下對細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)觀察。各種顯微鏡技術(shù)適用于活細(xì)胞成像：例如，可以采用無標(biāo)記的技術(shù)，如相差，DIC，或干涉測量法，也可以依靠熒光顯微鏡，利用熒光標(biāo)記標(biāo)記和可視化細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)、分子或蛋白質(zhì)。當(dāng)然，活細(xì)胞成像也面臨挑戰(zhàn)，在建立活細(xì)胞圖像實(shí)驗(yàn)時需要考慮某些要求。最重要的是，必須確保顯微鏡配備了一個stage top 培養(yǎng)箱，能夠提供理想的環(huán)境，使細(xì)胞在一段時間內(nèi)保持存活和健康。圖1.A：活細(xì)胞成像過程中需要考慮和控制的環(huán)境參數(shù) 圖1.B：倒置顯微鏡的臺頂培養(yǎng)箱示意圖　　　　參數(shù)和環(huán)境條件是此類實(shí)驗(yàn)的重要部分，我們將在以后的公眾號中討論。如果您有興趣，可以在本篇文章中查看更多相關(guān)內(nèi)容。在此我們已經(jīng)介紹了基本知識，接下來我們將繼續(xù)深入探討為什么您應(yīng)該使用活細(xì)胞成像來研究您的細(xì)胞：　　1.避免固定過程中的人工制品　　　　細(xì)胞通常在顯微鏡觀察前固定（如免疫熒光），以保存在逼真的狀態(tài)。多年來，許多不同的化學(xué)和物理程序已被優(yōu)化和建立，以保持原始樣品的質(zhì)量。然而，固定過程會對細(xì)胞造成損害（當(dāng)然在這個過程之后，它們會死亡），并不可逆轉(zhuǎn)地改變其組織、結(jié)構(gòu)和形態(tài)（細(xì)胞器收縮、蛋白質(zhì)定位錯誤等）。然而，活細(xì)胞成像可以讓我們研究活細(xì)胞。這意味著他們應(yīng)該展示他們的自然形態(tài)，這仍然會受到熒光標(biāo)簽、激光等的影響，但這就像環(huán)境條件一樣，是一個不同的狀況。　　　　2.觀察和分析動態(tài)過程　　　　活細(xì)胞成像使我們能夠觀察整個細(xì)胞群、單個細(xì)胞甚至亞細(xì)胞水平的動態(tài)事件。當(dāng)固定細(xì)胞將其鎖定在特定時間點(diǎn)的特定（行為或結(jié)構(gòu)）狀態(tài)時，對活細(xì)胞的顯微鏡觀察可以洞察整個動態(tài)過程。基于功能性細(xì)胞的檢測，如損傷和遷移（圖2）或趨化實(shí)驗(yàn)是活細(xì)胞成像應(yīng)用的很好的例子。這些分析使得研究細(xì)胞對化學(xué)（趨化性）或機(jī)械（傷口愈合）刺激的反應(yīng)成為可能。　　　　圖2：使用ibidi Stage Top孵育系統(tǒng)的活細(xì)胞成像顯示了傷口愈合和遷移試驗(yàn)中MCF7細(xì)胞的間隙閉合。相差；10倍物鏡。　　　　3.實(shí)時跟蹤細(xì)胞變化　　　　活細(xì)胞顯微鏡是實(shí)時了解細(xì)胞隨時空變化的一種有價值的方法，而不是依賴于固定細(xì)胞的端點(diǎn)的分析結(jié)果。通過使用延時視頻顯微鏡對細(xì)胞進(jìn)行更長時間的跟蹤，可以捕捉到結(jié)構(gòu)重排的動態(tài)(如圖3，感受趨化刺激后細(xì)胞骨架的極化), 或使用固定細(xì)胞可能會錯過的瞬時細(xì)胞性活動(如，有絲分裂期間的染色體分離)。　　　　圖3：應(yīng)用趨化梯度后，表達(dá)LifeAct的原代樹突狀小鼠細(xì)胞中肌動蛋白動力學(xué)的活細(xì)胞成像　　4. 研究單分子動力學(xué)、定位和相互作用　　　　先進(jìn)熒光標(biāo)記和成像技術(shù)的發(fā)展，如光脫色熒光恢復(fù)技術(shù)（FRAP）、熒光壽命成像顯微技術(shù)（FLIM）和熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)（FRET），使活細(xì)胞成像過程中單分子定位、動力學(xué)和相互作用的觀察和分析成為可能。　　　　FRAP可以測量活細(xì)胞內(nèi)熒光標(biāo)記分子和蛋白質(zhì)的遷移率。FLIM通過測量附著的熒光團(tuán)的壽命來提供有關(guān)細(xì)胞分子分布及其環(huán)境的信息。　　　　利用FRET，人們可以通過檢測兩個分子在納米級相互接近時所附熒光團(tuán)的相互作用來測量活細(xì)胞中兩個分子的直接相互作用。　　　　5. 從單個實(shí)驗(yàn)中獲取更多信息　　　　總的來說，如果您進(jìn)行活細(xì)胞成像，您可以從單個實(shí)驗(yàn)中獲得比從固定細(xì)胞成像更多的信息。這是因?yàn)榛罴?xì)胞成像使人們能夠跟蹤分子動力學(xué)和動力學(xué)，并提供了您感興趣的一個更大、更全面的細(xì)胞過程圖像。　　　　對固定樣本的分析通常只提供某個細(xì)胞性活動的快照，而跟蹤整個動態(tài)過程使人們能夠從單個實(shí)驗(yàn)中測量更多參數(shù)，并得出更多不同的結(jié)論。　　　　如您有興趣了解更多關(guān)于活細(xì)胞成像的知識，請關(guān)注我們公眾號活細(xì)胞成像應(yīng)用相關(guān)內(nèi)容。也可以向我們索要相關(guān)資料。　　　　活細(xì)胞成像應(yīng)用相關(guān)內(nèi)容：

2025-01-13 17:45:14自動細(xì)胞接種儀使用方法有哪些？: 自動細(xì)胞接種儀使用方法：提升實(shí)驗(yàn)效率與精確度在現(xiàn)代生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是實(shí)驗(yàn)室工作的核心之一。而自動細(xì)胞接種儀作為一種高效的實(shí)驗(yàn)工具，已被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)過程中，極大地提升了實(shí)驗(yàn)效率和準(zhǔn)確性。本篇文章將詳細(xì)介紹自動細(xì)胞接種儀的使用方法、注意事項(xiàng)以及其在實(shí)際應(yīng)用中的優(yōu)勢，幫助廣大科研人員更好地掌握其操作技巧，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。一、自動細(xì)胞接種儀的基本原理自動細(xì)胞接種儀通過機(jī)械化、自動化的方式來實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的接種。其原理是通過設(shè)定好細(xì)胞接種的時間、數(shù)量、培養(yǎng)皿規(guī)格等參數(shù)，儀器自動將細(xì)胞液均勻地分配到各個培養(yǎng)皿中。這一過程不僅大大節(jié)省了實(shí)驗(yàn)人員的時間，還能有效避免人為操作誤差，提高細(xì)胞接種的均勻性與重復(fù)性。自動細(xì)胞接種儀主要通過吸取細(xì)胞懸液、精確計(jì)量并將其精確分配到培養(yǎng)皿內(nèi)，確保每次接種的細(xì)胞數(shù)目和分布更加均勻。二、自動細(xì)胞接種儀的使用步驟準(zhǔn)備工作在使用自動細(xì)胞接種儀之前，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)首先準(zhǔn)備好所需的培養(yǎng)皿、細(xì)胞懸液和培養(yǎng)基。確保儀器的各個部件清潔，避免交叉污染。還需檢查儀器的設(shè)置，確認(rèn)設(shè)備已連接電源并啟動。設(shè)置參數(shù) 自動細(xì)胞接種儀的操作界面一般為觸摸屏，用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置細(xì)胞接種的相關(guān)參數(shù)。這些參數(shù)包括每個培養(yǎng)皿中的接種細(xì)胞數(shù)、接種的細(xì)胞量（通常以細(xì)胞數(shù)或細(xì)胞密度為單位）、每次接種的時間間隔等。接種操作設(shè)置完參數(shù)后，啟動儀器進(jìn)行接種操作。儀器會自動吸取細(xì)胞懸液，通過設(shè)定的吸管或分配裝置，將細(xì)胞均勻接種到各個培養(yǎng)皿中。在整個過程中，儀器會實(shí)時監(jiān)控接種的進(jìn)度，并根據(jù)設(shè)置的程序進(jìn)行調(diào)整。結(jié)束與清潔接種完成后，儀器會發(fā)出提示音，通知用戶操作結(jié)束。接著，用戶可以取出已接種的培養(yǎng)皿，放入適宜的培養(yǎng)環(huán)境中進(jìn)行孵育。儀器的各個部分需要按照規(guī)定進(jìn)行清潔和消毒，以避免細(xì)胞殘留物的堆積。三、自動細(xì)胞接種儀的優(yōu)勢提高實(shí)驗(yàn)效率自動細(xì)胞接種儀能顯著減少人工操作時間，提高工作效率。尤其是在大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)時，儀器能夠快速、地完成接種任務(wù)，節(jié)省大量的人工成本。減少人為誤差人為操作往往會導(dǎo)致細(xì)胞接種不均勻或細(xì)胞數(shù)量偏差。使用自動細(xì)胞接種儀后，接種過程可以嚴(yán)格按照設(shè)定的參數(shù)進(jìn)行，減少了操作中的不確定性和誤差，保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。提高接種精度自動細(xì)胞接種儀能夠精確控制細(xì)胞接種的數(shù)量和分布，尤其適用于需要高度精確的實(shí)驗(yàn)，如高通量篩選、藥物測試等領(lǐng)域。儀器的高精度控制確保每個培養(yǎng)皿中的細(xì)胞數(shù)目均勻，避免了因細(xì)胞數(shù)量不一致而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的情況。四、使用自動細(xì)胞接種儀的注意事項(xiàng) 定期保養(yǎng)與維護(hù) 自動細(xì)胞接種儀的長期穩(wěn)定運(yùn)行需要定期進(jìn)行維護(hù)。用戶應(yīng)根據(jù)設(shè)備手冊的要求，對儀器進(jìn)行定期清潔、校準(zhǔn)和檢修，確保儀器的性與穩(wěn)定性。注意環(huán)境控制盡管自動細(xì)胞接種儀可以減少人為因素的干擾，但細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的控制依然至關(guān)重要。接種前，應(yīng)確保培養(yǎng)環(huán)境無污染，接種后及時將培養(yǎng)皿放入適宜的溫度、濕度和二氧化碳濃度環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)。操作人員培訓(xùn) 盡管自動細(xì)胞接種儀具有較高的自動化程度，但操作人員仍需接受專業(yè)培訓(xùn)，熟悉儀器的操作流程、參數(shù)設(shè)置及注意事項(xiàng)，以確保設(shè)備的高效運(yùn)轉(zhuǎn)和實(shí)驗(yàn)的成功。結(jié)語自動細(xì)胞接種儀為現(xiàn)代細(xì)胞培養(yǎng)提供了、高效的解決方案，已成為生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究以及藥物開發(fā)中的重要工具。通過合理的參數(shù)設(shè)置和正確的操作方法，科研人員能夠更好地提升實(shí)驗(yàn)的效率與精度。掌握其使用方法，不僅能降低人工操作的風(fēng)險(xiǎn)，還能為細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)帶來更加可控和可靠的結(jié)果。

2023-03-20 14:23:30【THUNDER小課堂】腫瘤細(xì)胞中有絲分裂紡錘體的成像: 本文展示了如何使用THUNDER Imager Tissue和Large Volume Computational Clearing（LVCC）實(shí)現(xiàn)尤文（尤因）肉瘤細(xì)胞中有絲分裂紡錘體的更多細(xì)節(jié)觀察，從而協(xié)助本研究的進(jìn)行。活細(xì)胞成像等技術(shù)在了解腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移研究中至關(guān)重要。真核細(xì)胞中的有絲分裂紡錘體由中空的微管組成。它在有絲分裂期間的細(xì)胞內(nèi)重復(fù)染色體分離和分裂細(xì)胞細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的構(gòu)建過程中發(fā)揮著重要的作用。在尤文肉瘤這一類的腫瘤細(xì)胞中，有絲分裂障礙的觸發(fā)因子可通過檢查有絲分裂紡錘體的機(jī)能障礙來得以確認(rèn)。簡介使用熒光顯微鏡可以研究腫瘤形成和進(jìn)展過程中組織及細(xì)胞內(nèi)部發(fā)生的變化。像活細(xì)胞成像這樣的技術(shù)對更加深入地了解腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移是至關(guān)重要的。在真核細(xì)胞中，由中空微管組成的有絲分裂紡錘體，有助于構(gòu)建復(fù)制細(xì)胞的細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)，并在有絲分裂過程中將復(fù)制的染色體從原始細(xì)胞中分離出來。在尤文肉瘤這一類的腫瘤細(xì)胞中，有絲分裂障礙的觸發(fā)因子可通過檢查有絲分裂紡錘體的機(jī)能障礙來得以確認(rèn)[1]。肉瘤是肌肉或骨骼等結(jié)締組織中形成的一類腫瘤。尤文肉瘤和橫紋肌肉瘤，分別生長于骨骼和肌肉中，是一種傾向于發(fā)生在骨骼生長活躍區(qū)域附近的兒科腫瘤。除了手術(shù)和化療之外，電離輻射也被用于治療這類腫瘤，但這可能會導(dǎo)致生長中的骨骼受到永jiu性損傷，包括不對稱生長停滯、脛骨畸形及骨折概率增加等。骨骼損傷的嚴(yán)重度在很大程度上與骨骼接受的輻射劑量成正比。因此，我們有理由認(rèn)為，選擇性放射致敏腫瘤組織的策略可降低實(shí)現(xiàn)局部控制所需的輻射劑量，并能最大限度降低對鄰近健康組織造成的間接損傷。運(yùn)用體外研究和小鼠異種移植模型系統(tǒng)，對使用mRNA合成抑zhi劑光神霉素A預(yù)處理，可以通過改變輻射損傷的轉(zhuǎn)錄反應(yīng)實(shí)現(xiàn)選擇性放射致敏EWS：Fli1+腫瘤細(xì)胞的假設(shè)進(jìn)行了驗(yàn)證[2]。結(jié)果表明，光神霉素A可以通過抑zhi參與DNA損傷修復(fù)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，使EWS：Fli1+細(xì)胞在體內(nèi)外顯著放射增敏，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞程序性死亡[2]。使用THUNDER Imager Tissue和Large Volume Computational Clearing（LVCC）可以揭示肉瘤細(xì)胞中有絲分裂紡錘體的更多細(xì)節(jié)，協(xié)助癌癥研究人員獲得更有用的見解。挑戰(zhàn)在有絲分裂紡錘體成像中，可對其實(shí)現(xiàn)快速成像，并獲得清晰的高對比度3D成像，以清晰展示重要細(xì)節(jié)的解決方案最為實(shí)用。傳統(tǒng)的寬場顯微成像速度快，檢測靈敏度高，但不幸的是對于厚樣本的成像通常會出現(xiàn)失焦不清晰或模糊的情況，這會降低對比度[3]。要闡明有絲分裂的不穩(wěn)定性在癌癥等復(fù)雜疾病中的作用，這需要在同一樣本中進(jìn)行多個關(guān)聯(lián)生物學(xué)標(biāo)記。方法該研究中使用了尤文肉瘤細(xì)胞（SK-ES-1）。對這些細(xì)胞進(jìn)行α-微管蛋白（Clone YL1/2 Thermo-Fisher Scientific # MA1-80017，按1:500比例稀釋/ Dylight 488偶聯(lián)驢抗大鼠 Thermo-Fisher Scientific #SA5-10026）、γ-微管蛋白（Clone TU-30，AbCam # ab27074，按1:200比例稀釋/Dylight 550偶聯(lián)驢抗小鼠 Thermo-Fisher Scientific # SA5-10167）和DNA（Hoechst 33342藍(lán)）進(jìn)行染色。染色后，使用介質(zhì)ProLong Glass Antifade（Thermo-Fisher Scientific #P36981）進(jìn)行蓋玻片封片，并通過使用63×/1.4 NA（數(shù)值孔徑）的油鏡進(jìn)行THUNDER Imager Tissue成像。圖像采集使用大體積成像解析（LVCC）[3]模式，并生成最大化投影圖像數(shù)據(jù)。結(jié)果在有絲分裂過程中，α-微管蛋白（綠色）形成有絲分裂紡錘體，染色單體（藍(lán)色）會附著在有絲分裂紡錘體上，而γ-微管蛋白（紅色）集中定位在分裂細(xì)胞中的紡錘極上。通過THUNDER技術(shù)可觀察到肉瘤細(xì)胞中有絲分裂紡錘體的更多細(xì)節(jié)。清晰的圖像可以展示清晰的結(jié)構(gòu)，以便進(jìn)行分割和進(jìn)一步的分析。圖1：尤文肉瘤細(xì)胞SK-ES-1 α-微管蛋白（綠色）、γ-微管蛋白（紅色）和DNA（藍(lán)色）染色后的最大化投影：原始圖像數(shù)據(jù)（左）和THUNDER LVCC模式成像數(shù)據(jù)（右）。結(jié) 論 THUNDER Large Volume Computational Clearing（LVCC）[3]進(jìn)行尤文肉瘤細(xì)胞中的有絲分裂紡錘體成像時可顯著增強(qiáng)對比度。與傳統(tǒng)的寬場成像相比，其可展示細(xì)胞中有絲分裂紡錘體的更多細(xì)節(jié)。References：1.S. Rello-Varona, D. Herrero-Martín, L. Lagares-Tena, R. López-Alemany, N. Mulet-Margalef, J. Huertas-Martínez, S. Garcia-Monclús, X. García del Muro, C. Mu?oz-Pinedo, O. Martínez Tirado, The importance of being dead: cell death mechanisms assessment in anti-sarcoma therapy, Frontiers in Oncology (2015) vol. 5, p. 82, DOI: 10.3389/fonc.2015.00082.2.M. Yun Lin, T.A. Damron, M.E. Oest, J.A. Horton, Mithramycin A Radiosensitizes EWS:Fli1+ Ewing Sarcoma Cells by Inhibiting Double Strand Break Repair, Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. (2021) vol. 109, iss. 5, pp. 1454-1471, DOI: 10.1016/j.ijrobp.2020.12.010.3.J. Schumacher, L. Bertrand, THUNDER Technology Note : THUNDER Imagers: How Do They Really Work? Science Lab (2019) Leica Microsystems.相關(guān)產(chǎn)品THUNDER Imager Tissue全景組織顯微成像系統(tǒng)

2023-08-18 11:00:43如何分辨“真“、”假”全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀？: // 上一篇《給大家推薦一種細(xì)胞計(jì)數(shù)儀性能檢測的方法》中，我們發(fā)現(xiàn)全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測細(xì)胞樣品的重復(fù)性和梯度稀釋的結(jié)果準(zhǔn)確性上，都比半自動插板式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀更有優(yōu)勢。那么大家可能會問：“導(dǎo)致這樣的性能差異原因是什么呢？另外，目前市場上都自詡所賣的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是全自動的，那我們?nèi)绾螀^(qū)分哪個是‘真’，哪個又是‘假’的呢？”要回答這2個問題，首先我們需要對圖像法細(xì)胞計(jì)數(shù)的過程做下回顧。下面是圖像法臺盼藍(lán)染色細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析的基本流程。01細(xì)胞吹打混懸后定量吸取樣品02等體積吸取臺盼藍(lán)吹打染色03染色好的細(xì)胞加到血球計(jì)數(shù)板或細(xì)胞計(jì)數(shù)板上04顯微鏡下手動或自動統(tǒng)計(jì)死活細(xì)胞數(shù)，然后計(jì)算活細(xì)胞密度和活率05清洗血球計(jì)數(shù)板或更換新的細(xì)胞計(jì)數(shù)板傳統(tǒng)顯微鏡下手工細(xì)胞計(jì)數(shù)，以上5步操作都要操作人員來完成。這種方法因?yàn)槿藶椴僮鲙淼恼`差，導(dǎo)致結(jié)果差異有時會很大，甚至超出通常可以接受的±10%偏差范圍。并且隨著樣品數(shù)越多，操作人員會逐漸造成眼疲勞，無法繼續(xù)進(jìn)行有效并準(zhǔn)確地計(jì)數(shù)。手工顯微鏡法細(xì)胞計(jì)數(shù)的照片和計(jì)算方法插板式半自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的出現(xiàn)，省去了操作人員肉眼統(tǒng)計(jì)和分析死活細(xì)胞數(shù)的步驟，儀器操作只需要將樣品混勻、定量染色和上樣分析（有時要手動對焦），測試結(jié)束后更換新的細(xì)胞計(jì)數(shù)板做下一個樣品。用于半自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的各類細(xì)胞計(jì)數(shù)板移液槍加樣的照片半自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的缺點(diǎn)在于：由于每塊細(xì)胞計(jì)數(shù)板的檢測樣品數(shù)量有限，所以檢測新的樣品需要更換新的板子。但板子批次間存在差異，樣品和臺盼藍(lán)體積需要手動定量，取樣量少代表性差（從30-50mL樣品中一般就只吸取20uL樣品），染色后的細(xì)胞樣品通過移液槍加樣有時還產(chǎn)生氣泡而報(bào)廢，用后廢棄的細(xì)胞計(jì)數(shù)板會產(chǎn)生二次污染物，這些目前都還沒有好的處理方法。那有沒可能細(xì)胞的混勻和染色，以及細(xì)胞的計(jì)數(shù)和分析過程全部實(shí)現(xiàn)自動化，同時不用手動更換新的細(xì)胞計(jì)數(shù)板而自動做下一個樣品呢？答案是使用全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀。全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀相比半自動插板式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的優(yōu)勢點(diǎn)小結(jié)：01全自動吹打混懸和臺盼藍(lán)染色全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的一個顯著特點(diǎn)是：能夠自動完成細(xì)胞的吹打混懸和臺盼藍(lán)染色。要實(shí)現(xiàn)全自動吸取等體積的細(xì)胞樣品和臺盼藍(lán)染料，首先需要由儀器內(nèi)部的步進(jìn)馬達(dá)精確地完成加樣體積的控制。其次，因?yàn)榭梢匀詣游悠罚匀詣蛹?xì)胞計(jì)數(shù)儀會有1個轉(zhuǎn)盤或孔板放置其他待測樣品。對于排在后面的細(xì)胞若發(fā)生沉降，就需要在測試前對樣品進(jìn)行吹打混懸，以防止細(xì)胞沉降導(dǎo)致測試結(jié)果出現(xiàn)偏差。而這2步操作，半自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀都只能通過手動來完成，從而引入人為操作誤差。同時，Vi-CELL BLU全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀單個樣品檢測的取樣體積200±20uL，加樣體積不需要很準(zhǔn)確，儀器自動會完成定量取樣。相比半自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀只有10-50uL的取樣體積，而且由手動操作完成。取樣體積大代表性更好，測試結(jié)果更容易接近真實(shí)值。02動態(tài)百圖分析Vi-CELL BLU全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測試細(xì)胞樣品，單個樣品拍攝的照片達(dá)到了100張，分析的細(xì)胞數(shù)量更多，1x10e6個/mL的細(xì)胞懸液拍攝100張照片的細(xì)胞數(shù)差不多2600個。單個樣品檢測拍攝的細(xì)胞數(shù)越多，檢測結(jié)果的系統(tǒng)誤差越小，測試結(jié)果的重復(fù)性和準(zhǔn)確性也相應(yīng)更高。其中1張照片（上左圖）和100張照片的分析柱狀圖03高通量和不間斷檢測全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的另一個特點(diǎn)是高通量和不間斷檢測，即待測樣品可以先放到轉(zhuǎn)盤或96孔板上，根據(jù)軟件中設(shè)置好的分析條件，儀器會自動按要求完成細(xì)胞的計(jì)數(shù)和活率分析。Vi-CELL BLU全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀一次最多可以放21個樣品（使用24位轉(zhuǎn)盤）或96個樣品（使用96孔板）進(jìn)行分析測試。若使用24位轉(zhuǎn)盤，在檢測過程中還可以實(shí)現(xiàn)不間斷上樣測試，即樣品測試過程中，還可以放入新的待測樣品。綜上所述，全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在細(xì)胞樣品混懸和染色方面避免了人為操作帶來的誤差，同時百圖分析拍攝的細(xì)胞數(shù)多，結(jié)果代表性更好。所以，在細(xì)胞計(jì)數(shù)方面重復(fù)性和準(zhǔn)確性上相比半自動插板式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀更有優(yōu)勢。同時，全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的高通量和不間斷檢測功能，又滿足實(shí)驗(yàn)室樣品量大，不同老師共用該儀器的檢測需求。并且每個樣品測試結(jié)束后，儀器會自動進(jìn)行管路清洗，儀器本身還帶有自動過夜清洗功能，使得儀器一直處于待機(jī)狀態(tài)。所以，在操作便捷性上，全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀也勝過半自動插板式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。以上這些特點(diǎn)可以用于區(qū)分我們使用的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是“全自動”還是“半自動”，同時也是為何全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀性能上要優(yōu)于半自動的地方。希望大家可以通過這些方法來分辨“真”、“假”全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。