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2025-03-26 15:23:50步態評估
步態評估是一種通過觀察和分析個體行走時的姿勢、動作及步態特征來評估其身體功能狀態的方法。它涉及對步態周期、步長、步速、步寬、足印等參數的測量與分析,可用于診斷神經系統疾病、肌肉骨骼問題、平衡障礙等。步態評估有助于醫生了解患者的運動功能狀況,制定個性化的康復計劃,促進患者恢復正常的行走能力,提高生活質量。此外,在科研、體育訓練等領域也有廣泛應用。

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2023-02-15 14:27:47腫瘤疫苗生物學活性評估
腫瘤疫苗背景腫瘤疫苗,是一種具有預防和治 療潛力的有吸引力的替代免疫治 療選擇,是近年研究的熱點之一。針對腫瘤相關抗原(Tumor-associated antigen,TAA)或腫瘤特異性抗原 (Tumor specific antigen,TSA) 的疫苗可以特異性地攻擊和破壞抗原過表達的惡性細胞,并由于免疫記憶而實現慢性治 療反應。因此,與其他免疫療法相比,癌癥疫苗提供了特異性、安全性和可耐受的治 療。根據腫瘤抗原的組分,癌癥疫苗大致可以分為四種類型:基于 DNA 的疫苗,基于 RNA 的疫苗,基于多肽的疫苗和基于免疫細胞的疫苗。FDA 批準的首 個個性化腫瘤疫苗 PROVENGE (Sipuleucel-T) 是一種基于免疫細胞的疫苗,用于激素難治性前列腺癌的治 療。除此之外,Moderna,BioNTech 都在布局基于 mRNA 的腫瘤疫苗。圖 1 腫瘤疫苗抗原呈遞平臺示意圖腫瘤疫苗有效性評估方法生物體接種疫苗后,腫瘤抗原被帶到淋巴結,進而激活抗原特異性的 B 細胞和 T 細胞,活化的 B 細胞產生的抗體及活化的效應 T 細胞會使腫瘤內脹并誘導腫瘤細胞死亡。圖 2 腫瘤疫苗誘導的免疫反應示意圖如何有效的評估腫瘤疫苗的有效性是一個非常值得探討的問題,常用的腫瘤疫苗有效性驗證的方法,包括細胞因子檢測、CTL 活性檢測、T 細胞活化標志物檢測、抗體滴度檢測、ADCC 檢測等。1、細胞因子檢測細胞因子是由免疫細胞經過刺激而合成并分泌的小分子蛋白質,在免疫應答中起著非常重要的作用,因此可以通過細胞因子的分泌能力來反應疫苗誘導的細胞免疫的水平。常見的細胞因子有白介素 (IL) 、干擾素 (IFN)、 腫瘤壞死因子 (TNF) 等。下面比較了幾種常見的檢測方法。ELISA 是一種非常經典的細胞因子的檢測方法,例如在王曉東等人發表的關于胃癌疫苗研究的文章中,提到了用 ELISA 的方法檢測接種疫苗后小鼠骨 髓源樹突狀細胞(BMDCs)分泌細胞因子的能力,檢測方法如下:BMDCs 在含有 10ng/mL GM-CSF 和 10ng/mL IL-4 的 X-vivo 15 培養基中培養,37℃下培養 6 天,然后以每孔 5×104 細胞的密度在 96 孔板中接種。以 5μM 或 10μM 的最 終濃度加入疫苗抗原,孵育 24 小時。使用小鼠 TNF-α 和 IL-12 p70 ELISA Ready-SET-Go 試劑組定量培養上清中的 TNF-α 和 IL-12 。首先在 4℃下用捕獲抗體包被 ELISA 板過夜,然后在室溫下依次加入阻斷液、細胞培養上清和檢測抗體,孵育 1h 。 最 后加入終止液和顯色劑,用酶標儀 (BioTek) 在 450nm 處記錄 OD 值。檢測結果如下:從檢測結果可以看出,T7(TLR7 激動劑)的存在可以顯著提升 ML/MB 抗原誘導的免疫反應。圖 3 ELISA 法測定小鼠骨 髓樹突狀細胞 (BMDCs) 分泌TNF-α (a) 和 IL-12 (b) 的水平Ankita Leekha 等人發表的關于 SRAS-COV2 疫苗文章中,提到了用 ELISPOT 的方法評估細胞因子的分泌水平,可以作為參考。具體方法如下:從小鼠中分離脾細胞和肺細胞,使用小鼠 IFNγ ELISpot 基礎試劑盒和小鼠 IL4 ELISpot 基礎試劑盒 (Mabtech, VA, USA) 進行 IFNγ 和 IL4 ELISpot 檢測。在 37℃ 下,在預包被抗體的 ELISpot 板中,用抗原刺激脾細胞和肺細胞,培養 16-18 小時。第二天,洗掉細胞,加入生物素化的檢測抗體。洗板后,加入 1:30000 稀釋的 Extravidi-ALP 偶聯物,室溫孵育 1 小時。洗板后,每孔添加 70μL 顯色液,孵育 20-30min,形成斑點,然后用水清洗,干燥。使用 Cytation 7 (BioTek) 對斑點進行量化。每個點對應一個單獨的細胞因子分泌細胞。檢測結果如下:圖 4 ELIPSOT 方法檢測小鼠脾細胞和肺細胞分泌細胞因子的水平2、CTL 活性檢測疫苗誘導的細胞毒性 T 淋巴細胞 (CTL) 可以直接殺傷腫瘤細胞,起到抗腫瘤的作用,因此可以通過檢測 CTL 的殺傷效應來反應疫苗的效果。常用的檢測細殺傷效應的方法有很多,下表列舉了一些常用的方法。王曉東等人發表的文章中提到了 LDH 檢測,檢測方法如下:從接種疫苗小鼠的脾 臟中分離淋巴細胞(效應細胞)。EAC 腫瘤細胞(靶細胞)與淋巴細胞(效應細胞-靶細胞比例為 50:1)共培養 4h,使用乳酸脫氫 (LDH) 法測定細胞毒性。將培養 4h 后的培養上清加入在 ELISA 板中,室溫下加入底物溶液,孵育 30min。最 后,加入終止液終止反應,并用酶標儀 (BioTek) 在 490nm 處檢測光密度。檢測結果如下:相對于 PBS 對照組來說,T7-MB 組 CTL 細胞具有顯著的殺傷效應。圖 5 LDH 法測定 CTL 介導的 EAC 靶細胞的裂解水平3、抗體滴度及親和力檢測腫瘤疫苗除了可以誘導細胞免疫之外,也可誘導體液免疫,對此可通過對抗體滴度及親和力進行檢測來反應疫苗抗腫瘤的效果,ELISA 是一種非常經典的檢測方法。上述關于胃癌疫苗的文章中通過 ELISA 方法測定小鼠接種疫苗后血清中總 IgG 含量,具體檢測過程如下:小鼠接種疫苗后收集血液樣本,通過 3000g 離心 15 分鐘獲得血清樣本。ELISA 板預先在 4℃ 包被 BSA-MG1 過夜,然后在室溫下依次加載封閉溶液 2h,血清樣品 (1:50 稀釋) 和檢測抗體 1h。最 后,在體系中加入 p-NPP 底物 (Millipore) 和終止液,用酶標儀 (BioTek) 在 405nm 處記錄 OD 值。檢測結果如下:相對于 PBS 對照組來說,T7-MB 組抗體含量明顯上升。圖6 ELISA法測定疫苗誘導的血清抗體水平除此之外,在 Emily C. Gale 等人發表的關于 mRNA 遞送系統及輔劑研究的文章中,通過 ELISA 的方法測定了 mRNA OVA 模式疫苗誘導的 OVA 特異性抗體的絕 對含量及其親和力。具體檢測方法如下:抗體濃度:小鼠接種加強疫苗后,采集血液樣品,血清按照 1:100 000 進行稀釋。采用 anti-OVA mouse IgG1 ELISA (Cayman Chemicals) 試劑,按照試劑廠家的說明進行 ELISA 實驗。使用 Synergy H1 Microplate Reader (BioTek) 在 450nm 處記錄 OD 值。根據標準曲線計算血清抗體濃度,表示 mg/mL??贵w親和性:將 12 個梯度稀釋的血清與恒定濃度標記 HRP 的 anti-OVA 抗體 (3nM) 混合,并在 OVA 抗原包被的板中室溫孵育 2 小時,洗板后用 TMB 底物孵育,用 HCl 停止反應。測定 450nm 處的 OD 值。根據業內發現的單克隆抗體的共同親和力,假設對照抗體的 KD 為 1nM 對實驗組的 KD 值進行統計。這一假設僅影響報告的絕 對 KD 值,而不影響實驗組之間的相對差異。檢測結果如下:pIC 為雙鏈 RNA 結構模擬物,圖E中比較了可溶性的 pIC 和不同納米顆粒遞送系統誘導的絕 對抗體含量,從圖 E 中可以看出 2B 遞送系統誘導的 OVA 特異性抗體含量最 高。從F和G可以看出 2B 遞送系統相對于可溶性 pIC 來說誘導的 IgG 親和力也顯著升高。圖 7 pIC/PBAE NPs 增強體液免疫4、ADCC 檢測疫苗誘導體液免疫產生的抗體能夠捕捉目標抗原,阻斷這個靶分子的功能,也可以引導其他免疫細胞(如巨噬細胞和自然殺傷細胞)殺死表達抗原的靶細胞,在腫瘤治 療中,特別是血液腫瘤中,抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用 (ADCC) 起著關鍵作用,ADCC 常用的檢測方法包括細胞活力檢測、LDH 檢測、工程細胞株、Delfia、RTCA、細胞成像檢測等。王曉東等人發表的關于胃癌疫苗研究的文章中,提到了 LDH 方法檢測 ADCC,檢測方法如下:小鼠接種疫苗后,采集其血清樣本(1:25 稀釋),然后與 EAC 細胞(靶細胞)在 37°C 孵育 30min。使用小鼠 NK 細胞分離試劑盒從正常 BALB/c 小鼠中分離出自然殺傷 (NK) 細胞(效應細胞),與抗體標記的 EAC 細胞以效靶比 50:1 共培養 4 小時。采用 LDH 法 (Promega) 測定細胞毒性,檢測方法與之前提到的 CTL 活性檢測的方法一致。檢測結果如下:相對于 PBS 對照組來說,T7-MB 組產生的抗體具有顯著的殺傷效應。圖 8 LDH 法測定血清抗體介導的 EAC 靶細胞的裂解水平腫瘤疫苗生物學活性檢測解決方案推薦本文介紹了腫瘤疫苗活性檢測的常用方法,包括細胞因子檢測、CTL 活性檢測、抗體滴度及親和力檢測、ADCC 檢測等方法,涉及到了酶標儀、成像系統、流式、RTCA、洗板分液系統等設備。Agilent 細胞分析事業部可以從多個角度為用戶提供從樣品處理,到結果檢測再到數據分析的全面解決方案。
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2022-10-31 14:14:47嚙齒類動物的外周神經損傷如何評估?
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2023-01-31 15:25:45使用眼科手術顯微鏡術中OCT進行殘留碎片評估
憑借顯著優化視野的高jingzhun性和同步性,眼科手術顯微鏡術中OCT成像系統可以幫助眼科醫生在眼科手術中實現高水準的手術效果。眼外科醫生分享了在白內障和視網膜手術中使用眼科手術顯微鏡術中OCT的經驗。關鍵經驗眼科手術顯微鏡有一種內置術中OCT的高級成像解決方案,設計用于改善眼前后節手術的工作流程,實現高精準度。醫生分享了在白內障手術中使用眼科手術顯微鏡術中OCT成像系統的體驗。醫生特別強調了使用這款成像解決方案在檢測和處理殘余晶狀體碎片的優勢。由于這些晶狀體碎片會被手術切口或水腫遮擋,因此很難看到。眼科手術顯微鏡術中OCT可以有效定位殘留晶狀體碎片,從而改善手術效果,降低術后并發癥和二次手術的風險。關 于 EnFocusEnFocus是用于眼科手術顯微鏡的術中OCT。它可以呈現出高度清晰的實時眼前節和眼后節圖像,便于觀察眼底下表面顯微結構。除了角膜移植術和白內障手術,在角膜、青光眼和視網膜手術中,術中OCT同樣可以提供相同的優勢。它也是基因治療中一項重要的輔助工具。EnFocus可以結合眼科手術顯微鏡使用,提供全面的可視化效果。免責聲明:本文中醫療專業人員的陳述和解釋僅代表其個人觀點和經驗,并不代表其所屬機構的觀點。殘留晶狀體碎片評估除了視網膜手術這一典型的適用領域,術中OCT在白內障手術中也能夠發揮重要的作用,尤其是用于評估殘留晶狀體碎片。手術結束時,我懷疑存在晶狀體碎片。借助術中OCT,可以突出顯示殘留碎片。碎片尺寸較大,隱藏在主切口的水腫后面。當碎片尺寸相對較小,隱藏在輔助切口后面。然而,這些碎片受切口附近的角膜水腫影響,很難發現。這時候術中OCT便可以發揮重要的作用。一般是對眼后節進行360°環形掃描。使用顯微鏡腳踏開關,可以返回手術區域并分析圖像。這樣就可以看到輔助切口水腫后面有一個隱藏的殘留碎片。在別的眼科手術中也能看到虹膜角膜角度有微小的殘留碎片。術中OCT的優勢在眼科手術中,術中OCT可以在白內障手術中發揮重要的作用。醫生可以用它發現殘留碎片,避免幾天或幾周后進行二次手術,還可以減少術后并發癥。所以說,術中OCT是一種提高白內障手術質量和完善性的有效工具。
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2023-06-26 14:52:50無損無接觸定量評價!GaN晶體質量評估新思路——ODPL法!
隨著疫情三年的結束,大家又開始馬不停蹄出差、旅游、返鄉,生活的壓力讓人喘不過氣。更別提出行的時候,還需要背一個很沉的電腦,以及與它適配的、同樣很沉的、形狀不規律的、看著就很糟心的電源適配器!有沒有一種東西,能夠讓大家的出行變得更加輕松(物理上)?那必須是現在越來越流行的氮化鎵(GaN)充電器了!一個氮化鎵充電器幾乎可以滿足所有出行充電的需求,并且占地空間小,簡直是出行神器!圖1 氮化鎵(GaN)充電器氮化鎵是一種無機物,化學式GaN,是氮和鎵的化合物,一種直接能隙(direct bandgap)的半導體材料。GaN材料具有寬禁帶、高臨界電場強度和高電子飽和速度等特點,其器件耐高溫、耐高壓、高頻和低損耗,大大提升電力器件集成度,簡化了電路設計和散熱支持,具有重要的價值和廣泛的應用,是現在最 火熱的第三代半導體材料,沒有之一。GaN的應用不止在流行的充電器上,早在2014年日本科學家天野浩就憑借基于GaN材料的藍光LED獲得了諾貝爾獎。不過GaN就沒有缺點了嗎?或者說GaN沒有改善的地方了嗎?并不是, GaN技術的難點在于晶圓制備工藝。由于制備GaN的單晶材料無法從自然界中直接獲取,所以GaN的主要制備方法是在藍寶石、碳化硅、硅等異質襯底上進行外延。而現在由異質外延生長的GaN普遍存在大量缺陷的問題。缺陷的存在勢必會影響到晶體的質量,從而影響到材料和器件的電學性能,最 終影響到未來半導體科技的快速發展。因此,降低GaN晶體里面的缺陷量,提高晶體質量,是當前第三代半導體領域研究很重要的一個課題。GaN晶體質量/缺陷評估的方法GaN晶體里面的雜質、缺陷是非常錯綜復雜的,無法單純通過某一項缺陷濃度或者雜質含量來定量描述GaN晶體是否是高質量,因此現在評價GaN晶體質量的手段比較有限。根據現有的報道,大致有以下幾種:多光子激發光致發光法(Multiphoton-excitation photoluminescence method,簡稱MPPL)、蝕坑觀察法(Etch pit method)以及二次離子質譜(Secondary-ion mass spectrometry,簡稱SIMS)。MPPL法多光子激發光致發光法采用長波長激發,遠大于帶邊熒光波長。激發過程需要同時吸收二個或者多個光子。通過吸收多個脈沖光子,在導帶和價帶形成電子空穴對,隨后非輻射馳豫到導帶底和價帶頂,最 后產生帶邊發光和缺陷發光。通過濾波片獲得帶邊和缺陷發光光譜和光強,改變入射光斑的位置,從而得到樣品的熒光信號三維分布,即三維成像。多光子熒光三維成像技術可以識別和區分不同類型的位錯,但是無法定量評估GaN的晶體質量,而且多光子激發的系統造價高。圖2 (a) Optical microscope image of etch pits. (b) 42 × 42 μm2 2D MPPL image taken at a depth of 22 μm. (c) 42 × 42 × 42 μm3 3D MPPL image, shown with contrast inverted參考文獻:Identification of Burgers vectors of threading dislocations in free-standing GaN substrates via multiphoton-excitation photoluminescence mapping' by Mayuko Tsukakoshi et al; Applied Physics Express, Volume 14, Number 5 (2021)蝕坑觀察法蝕坑觀察法通過適當的侵蝕可以看到位錯的表面露頭,產生比較深的腐蝕坑,借助顯微鏡可以觀察晶體中的位錯多少及其分布。該方法只適合于位錯密度低的晶體,如果位錯密度高,蝕坑互相重疊,就很難將它們區分。并且該方法是對晶體有損傷的,做不到無損無接觸。圖3 蝕坑觀察法SIMS技術SIMS是利用質譜法分辨一次離子入射到測試樣品表面濺射生成的二次離子而得到材料表面元素含量及分布的一種方法。SIMS可以進行包括氫在內的全元素分析,并分辨出同位素、化合物組分和部分分子結構的信息。二次離子質譜儀具有ppm量級的靈敏度,最 高甚至達到ppb的量級,還具有進行微區成分成像和深度剖析的功能。但是SIMS對晶體有損傷,無法做到無損。圖4 SIMS技術以上三種技術均是評估GaN晶體缺陷的方法,但是每一種都有其缺憾的地方,它們無法做到定量的去評價GaN晶體的質量,而且具有破壞性。為了更好地定量評估GaN晶體質量,濱松公司和日本Tohoku University的Kazunobu Kojima教授以及Shigefusa Chichibu教授從2016年開始合作研發了一套基于積分球的全向光致發光系統(Omnidirectional Photoluminescence,以下簡稱ODPL),該系統是第 一個無損無接觸定量去評價GaN晶體質量的方法/系統。ODPL系統ODPL系統是首 個無接觸無損評價半導體材料晶體質量的方法,通過積分球法測量半導體材料、鈣鈦礦材料的內量子效率。該產品可以直接測量材料 IQE,具有制冷型背照式 CCD 高靈敏度以及高信噪比。圖5 ODPL測量方法示意圖傳統光致發光的量子效率測量指的是晶體的PLQY,即光致發光量子效率,其定義為:PLQY = 樣品發射的光子數/樣品吸收的光子數圖6 GaN樣品在積分球下的發射光譜PLQY是表征晶體發光效率最 常見的參數之一,對于絕大多數的發光材料,PLQY都是黃金標準。但是對于GaN晶體,PLQY的表征顯得不足。上圖可見,GaN的光致發射光譜呈雙峰形狀,這是由于GaN晶體中的缺陷等,會將GaN本身發射的PL再次吸收然后發射(光子回收Photon Recycling現象)。圖7 ( a ) PL and ODPL spectra of the HVPE / AT - GaN crystal and ( b ) detectable light - travelling passes considered in the simulation of light extraction :(1) direct escaping from the surface :( ii ) scattered at the bottom and escaping from the surface : and ( ii ) direct eseaping from the edge .( c ) Refractive index and absorption spectra of HVPE / AT - GaN .因為存在Photon Recycling的現象,GaN的PLQY不足以表征其發光轉化效率,而真正可以表征GaN晶體發光轉化效率的定義是其真正的內量子效率:IQE = 樣品產生的光子數/樣品吸收的光子數圖8  GaN樣品的標準發射光譜IQE是GaN晶體的PLQY考慮LEE和光子回收現象以后的參數,更能直觀、定量反映GaN晶體的質量。圖9  高IQE和低IQE晶體的對比高IQE的GaN晶體通常表現為:高載流子濃度、低穿透位錯密度、低雜質濃度、低點缺陷濃度、高激發功率密度。圖10 不同穿透位錯密度晶體的IQE結果對比免費樣機預約ODPL現在ODPL樣機開放免費預約試 用活動,有意向的客戶請在評論區留言“樣機試 用”小編看到之后會第 一時間與您聯系,樣機數量有限,先到先得喲~圖11 ODPL樣機展示以上有關新品的信息已經全部介紹完畢了,如有任何疑問,歡迎在評論區留言喲。
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2022-11-28 13:15:05面包面團、酒類釀造、生物乙醇等發酵特性評估新方法
發酵特性分析儀 產地:日本  型號:WSF-2000MH 系列 全自動記錄樣品發酵過程中產生的氣體總量和產氣速度的變化過程發酵特性分析儀是一種通過自動持續測量并記錄各種樣品在微生物發酵過程中產生的氣體總量和產氣速度的變化曲線,來有效地評估酵母等微生物的發酵能力、培養基(面團、啤酒等)發酵特性及樣品的發酵條件等,也可以長時間監測面包面團、酒類釀造、生物乙醇相關的發酵過程以及BP(發酵粉=化學膨脹劑)等化學過程產氣量。廣泛應用于樣品發酵特性評估、發酵菌株培育和篩選、面包制作和酒類釀造的質量控制、培養基組成和發酵條件評估等。儀器原理及構成Principle And Composition樣品發酵過程中產生氣體,氣體通過氣液置換水柱壓力計,推動壓力計中的水柱的變化,再通過壓力傳感器檢測到的壓力和裝置內部溫度傳感器檢測到的溫度計算產生氣體的體積總量及產氣速率。CO2氣體溶解于水中,因此氣體的回收率不到100%, 通過預先用碳酸氣體飽和壓力計的水等,在某種程度上抑制誤差。測量結果為樣品產生的總氣體量和每個測量間隔的氣體生成速率。另外,將樣品分成兩部分,通過CO2吸收瓶測量其中一部分產生的氣體,從而測量樣品中的內部未釋放出來的氣體。優勢特點及應用Characteristics And Application01 性能優勢1. 多樣品測量:最多可測20個樣品;2. 每個樣品瓶可單獨控制,單獨測量,數據曲線單獨記錄,各樣品瓶間檢測相互不影響;3. 測量總氣體發生量、氣體發生速度、面包面團內藏氣體量等,氣體發生量可以切換體積(mL)及重量(g)表示;4. 固定時間間隔,長時間檢測:時間間隔5-120s可設(5s為單位)、5-120min可設(5min為單位)。秒間隔:最長23小時59分;分間隔:最長可達90天;02  應用領域微生物產生的氣體量變化是細菌代謝和活動的重要指標。本裝置的測定數據可用于各種工藝的過程控制,最佳培養基組成和發酵條件的探索等。微生物——菌株的育種、烘焙制品、酒類釀造、醬油、食品腐敗、工業酒精以及甲烷氫氣等領域,如小麥粉品質評價、釀造品質控制、微生物菌株篩選等?;瘜W方面——食品膨脹劑、發泡劑、洗滌劑、入浴劑以及醫藥品等領域,如膨化劑、發泡劑等的新品開發和質量管控等。
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