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2025-01-10 10:49:50分析超速離心方法: 分析超速離心方法是一種基于物質沉降系數差異進行分離的技術。它利用強大的離心力場，使樣品中不同沉降系數的顆粒在離心場中沉降速度不同，從而實現分離。該方法常用于生物大分子如蛋白質、核酸等的純化與分析，也適用于病毒、細胞器等顆粒的分離。其特點包括分辨率高、操作簡便、適用范圍廣等。

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三種不同的分析超速離心方法用于病毒載體表征

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分析超速離心方法

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分析超速離心方法問答

2023-02-23 17:08:16分析型超速離心（AUC）文獻快報-2月刊: Development of a SARS-CoV-2 Vaccine Candidate Using Plant-Based Manufacturing and a Tobacco Mosaic Virus-like Nano-Particle使用基于植物制造和煙草花葉病毒樣納米顆粒開發SARS-CoV-2候選疫苗發表日期：17 November 2021DOI：https://doi.org/10.3390/vaccines9111347摘要：穩定、有效、易于制造的疫苗對于阻止由冠狀病毒 SARS-CoV-2 引起的 COVID-19 大流行至關重要。我們構建了一種候選疫苗 CoV-RBD121-NP，它由刺突糖蛋白 (S) 的 SARS-CoV-2 受體結合域 (RBD) 與人 IgG1 Fc 域 (CoV-RBD121) 融合并結合到改良的煙草花葉病毒 (TMV) 納米顆粒上。在體外，CoV-RBD121與宿主病毒受體ACE2和單克隆抗體 CR3022 結合，CR3022 是一種阻斷S與 ACE2 結合的中和抗體。CoV-RBD121-NP候選疫苗保留了關鍵的SARS-CoV-2刺突蛋白表位，具有一致的安全性、一致性和強度，并且在 2–8°C 或 22–28°C下儲存 12 個月時顯示出穩定的效力。免疫原性研究表明，在使用非佐劑或佐劑 (7909 CpG)后，C57BL/6小鼠產生了強烈的抗體反應。非佐劑疫苗誘導了平衡的 Th1/Th2 反應和識別 SARS2-CoV-2 的 S1 結構域和完整 S 蛋白的抗體，而佐劑疫苗誘導了 Th1 偏向反應。佐劑和非佐劑疫苗均誘導病毒中和滴度，如通過三種不同的測定法所測量的。總的來說，這些數據表明，通過 SARS-CoV-2 RBD 與 TMV 樣納米顆粒的結合，可以生產穩定的 COVID-19 候選疫苗。儀器型號：ProteomeLab XL-A 分析超速離心機、AN-50Ti轉子CoV-RBD121-NP 的物理特性(A)TMV Ntk病毒體和CoV-RBD121-NP（與抗原結合后的病毒體）的透射電子顯微鏡結果。黃色箭頭表示結合抗原的位置）。比例尺 = 200 納米。(B) CoV-RBD121-NP 在釋放時以及在 2–8 °C下儲存后1個月和3個月的大小分布。根據分析超速離心(AUC)后的曲線下面積計算分布。(C) CoV-RBD121-NP在2-8 °C或22-28 °C下儲存后6個月或12個月的尺寸分布。基于AUC分析的百分含量。AUC實驗條件：將 TMV NtK 和結合疫苗稀釋至目標濃度，并使用光程為12 mm的2通道樹脂中心件，將樣品加載到樣品池中。加載的樣品池被放置在AN-50Ti轉子中，并在Beckman-Coulter ProteomeLab XL-A 分析超速離心機中以 9000rpm 的速度分離。每 4 分鐘記錄一次掃描，持續4 小時（每個樣本 60 次掃描）。數據使用 SEDFIT (vs. 11.3) 軟件（美國國立衛生研究院，貝塞斯達，馬里蘭州，美國）進行分析。勾選f/f0 值擬合，以找到每個樣本數據最適合的擬合結果。使用的置信區間為0.683，勾選擬合time-invariant noise。使用 OriginLab Origin vs. 9.0.0（OriginLab, Northampton, MA, USA）繪制所得尺寸分布圖，并對峰積分。REFERENCERoyal JM, Simpson CA, McCormick AA, Phillips A, Hume S, Morton J, Shepherd J, Oh Y, Swope K, DeBeauchamp JL, Webby RJ, Cross RW, Borisevich V, Geisbert TW, Demarco JK, Bratcher B, Haydon H, Pogue GP. Development of a SARS-CoV-2 Vaccine Candidate Using Plant-Based Manufacturing and a Tobacco Mosaic Virus-like Nano-Particle. Vaccines (Basel). 2021 Nov 17;9(11):1347.Subunit Flexibility of Multimeric von Willebrand Factor/Factor VIII Complexes多聚血管性血友病因子/因子VIII復合物的亞基柔韌性作者：Ernest T. Parker, Sandra L. Haberichter, and Pete Lollar發表日期：25 August 2022DOI: https://doi.org/10.1021/acsomega.2c03389摘要：血管性血友病因子(VWF)是一種參與血小板粘附和聚集的血漿糖蛋白，是凝血因子VIII (blood coagulation factor VIII, fVIII)的載體。血漿VWF由多聚體組成，分子量從~ 0.55 MDa到10 MDa以上。VWF多聚物由一個可變數量的二硫連接~ 275 kDa的子基組成。本文在pH為7.4的條件下，用色譜法對血漿源性人VWF/fVIII配合物進行分離，并對其進行凝膠電泳、沉降速率法分析超離心(SV AUC)、動態光散射(DLS)和多角度光散射(MALS)檢測。本研究結果與非流動條件下VWF多聚物模型的結果一致，在非流動條件下，多聚物具有顯著的靈活性。對于同源系列聚合物，如VWF多聚體的分布，分子質量與回轉半徑、沉降系數或用擴散系數作為大分子的診斷指標構象。目的：表征VWF多聚物型號：Beckman?Coulter XLI實驗條件：20°C，上樣量400uL, 吸光度280nm, 使用sedfit進行分析，置信區間設置0.68實驗結果：圖1：sepacryl S-1000 VWF/FVIII樣品, 280 nm處從左到右的吸光度掃描原始數據圖2：c(s) 模型擬合后得數據，樣品1 (藍色), 9 (綠色), 13 (紅色)圖3：VWF/fVIII Complexes 的SV AUC數據匯總BibliographyParker, E.T., Heritier, S.L. and Lollar, P., 2022. Subunit flexibility of multimeric von Willebrand factor/factor VIII complexes. ACS omega, 7(35), pp.31183-31196.SV-AUC as a stability-indicating method for the characterization of mRNA-LNPsSV-AUC作為一種表征mRNA-LNPs穩定性的可行方法發表日期：14 November 2022DOI:doi.org/10.1016/j.ejpb.2022.11.014摘要：在SARS-CoV2大流行期間，以包裹mRNA的脂質納米顆粒(LNPs)形式生產的mRNA疫苗，開創了一個新的疫苗領域。對于LNPs大小和結構變化進行定量分析是至關重要的，因為這些參數的變化可能對疫苗的效價產生影響。本項研究中，我們使用分析超離心機，以沉降速度 (SV-AUC)的方法對mRNA-LNP疫苗在相關應激因素(凍融、熱、機械應力等)作用下的結構變化進行了穩定性定量分析，同時對比了DLS的相關數據。DLS能夠準確的對mRNA-LNPs的大小和均一性進行表征。在壓力因素下，如凍融和機械應力的作用下，DLS和SV-AUC都能檢測到顆粒粒徑和大顆粒物含量的增加。而50℃熱應力的變化僅通過SV-AUC浮選的速率的變化被檢測到。此外，SV-AUC可以觀察到顆粒密度的變化，這是DLS無法檢測到的。總之，SV-AUC是一種很有價值的mRNA-LNPs穩定性定量表征方法。目的：表征mRNA-LNPs的應激穩定性儀器型號：Optima AUC，AN-50 Ti轉子SV-AUC對mRNA-LNPs進行表征數據不同應激條件下，通過SV-AUC對主峰和高分子量峰1進行量化。實驗條件：20℃下，將樣品和buffer溶液放入帶藍寶石窗口的雙區中心件，在AN 50-Ti 轉子上以每分鐘 10,000 轉下進行離心，檢測260 nm and 280 nm吸收峰，檢測間隔120 s，檢測間隔10 μm。使用UltraScan III對前95條數據進行分析，使用2DSA模型，對時間和徑向噪音進行擬合。在最終的擬合計算中，使用CSA-SL-MC模型，選擇范圍：1 S到 200 S (主峰), 200 S到1200 S(高分子量峰1) ，1200 S到2000 S (高分子量峰2)。通過計算得到加權平均沉降系數和摩擦系數比(f/f0)，以及相對含量。REFERENCEE. Brookes, W. Cao, B. Demeler, A two-dimensional spectrum analysis for sedimentation velocity experiments of mixtures with heterogeneity in molecular weight and shape, Eur. Biophys. J. 39 (3) (2010) 405–414.

2023-01-14 16:40:20分析型超速離心（AUC）文獻快報-1月刊: Binding of the HSF?1 DNA?binding domain to multimeric C. elegans consensus HSEs is guided by cooperative interactionsHSF?1 DNA與C. elegans HSEs的結合作用研究發表日期：28 May 2022DOI：https://doi.org/10.1038/s41598-022-12736-x摘要：熱休克轉錄因子(HSF)是熱休克反應(HSR)的重要轉錄激活因子，它激活HSR基因，如Hsp70，HSPs和HSP40s，并與熱休克要素(HSEs)結合誘導保守熱休克蛋白上調。除了這些眾所周知的HSPs之外，在線蟲基因的啟動子區域還發現了4000多個其他HSPs。線蟲的HSF-1是一種含有671個氨基酸的蛋白質，像其他HSF蛋白一樣，HSF-1由 N端DNA結合域(DBD)，寡聚結構域和羧基端調控結構域組成。本文的目的是了解HSF-1如何與不同啟動子相互作用，為此，作者純化了線蟲HSF-1 DBD，研究其與來自線蟲基因組的不同調控HSEs的相互作用。目的：使用沉降速率法分析型超速離心技術(SV-AUC)來確定HSF-1 DBD與HSEs結合的化學計量比、親和性。儀器型號：ProteomeLab XL-A實驗數據：圖1: 通過SV-AUC分析特定啟動子與Hsf-1 DBD的相互作用。HSF-1 DBD以0 - 15倍的過量濃度滴定到每個啟動子中。向右的移動表示HSF-1 DBD與DNA結合。左圖為260 nm處測量的吸光度的Dc /dt，右圖為280 nm。使用的啟動子分別為:(a) HSP-70;(b) HSP16.2a;(c) HSP16.2 b;(d) HSP-1;(e) DNJ-13;(f) UNC-23;(g) DNJ-12。表1：用于自定義網格擬合方法的參數。在這個模型中，HSE被嵌入到相同尺寸的探針中，S為沉降系數。表2：通過SV-AUC擬合計算KD值。沒有顏色=結合，橙色=弱結合，紅色=無結合。實驗結果：在線蟲基因組中有4120個SHE，它們在起始密碼子上游500 bp處含有HSF-1結合區。令人驚訝的是，盡管有許多HSF-1調控基因，但典型的熱休克反應僅對應8個基因，其中7個由HSF-1結合啟動子區域調控。因此，HSF-1的作用所產生的調控程度遠遠超出了脅迫條件下應激基因的誘導，在非脅迫條件下可以達到線蟲的正常生長周期。在較大的生物體中，這種方法能夠將不同的派系連接到不同的組織和發育狀態。AUC實驗條件：未說明REFERENCESchmauder, L., Sima, S., Hadj, A.B., Cesar, R. and Richter, K., 2022. Binding of the HSF-1 DNA-binding domain to multimeric C. elegans consensus HSEs is guided by cooperative interactions. Scientific Reports, 12(1), pp.1-19.Atomic Structures of Coxsackievirus B5 Provide Key Information on Viral Evolution and Survival柯薩奇病毒B5原子分辨率結構提供有關病毒進化和生存的關鍵信息發表日期：20 April 2022DOI: https://doi.org/10.1128/jvi.00105-22摘要：柯薩奇病毒B5 (CVB5) 是人類腸道病毒B (EVB) 的主要血清型，可引起嬰兒和兒童的嚴重病毒性腦炎和無菌性腦膜炎。目前，尚無針對CVB5感染的獲批疫苗或抗病毒療法。在這里，我們確定了三種形式的CVB5原子分辨率結構：成熟 (F) 粒子 (2.73 ?)（Full）、中間(A) 粒子 (2.81 ?)( intermediate) 和空衣殼(E)粒子 (2.95 ?) （empty）。CVB5的 F 粒子的結構分析揭示了與其他 EV-B 相似的“canyon” “puff” 和“knob” 結構。我們觀察到在從 F 粒子到 A 粒子的轉變過程中存在相似的結構重排，表明所有 EV-B 共有相似抗原性、細胞進入和脫殼機制。進一步比較所有已知EV-B結構和序列表明，雖然中和抗體靶向的殘基是多樣化的且推動了EV-B的進化，但脫殼受體識別的相對保守的殘基可以作為開發抗病毒疫苗的基礎和療法。IMPORTANCE：CVB5作為腸道病毒B的主要血清型之一，近年來被廣泛報道。此處顯示的 CVB5 原子分辨率結構揭示了 EV-B 中發現的經典特征以及粒子膨脹和脫殼過程中發生的結構重排。此外，CVB5與其他結構已知的EV-B之間基于結構和序列的比較篩選出對病毒進化和存活重要的關鍵域。所有這些都為 EV-B 的疫苗和治療方法的開發提供了見解。儀器型號：Beckman XL-I 分析超速離心機、貝克曼制備型超速離心機CVB5純化和結構測定(a) 用于 CVB5 純化的蔗糖密度梯度濃度 (15%-45%)，如材料和方法中所述。觀察到兩條明顯的條帶，上條帶A260/A280吸收比為0.65，主要含E粒子，下條帶吸收比為1.83，主要含F粒子。(b) 分析超速離心 (AUC)。該樣品產生了兩個主要的峰，沉降系數分別為 80 S和143 S。AUC實驗條件：在 20°C 條件下，在Beckman XL-I 分析超速離心機上進行沉降速率實驗。制備的高濃度樣品用 PBS 緩沖液 (pH 7.4) 稀釋至400 微升，在A280 nm處吸收約為 0.7，并進一步加樣至到雙扇形石英樣品池中，然后放置于Beckman四孔 An-60Ti 轉子中。在 280 nm波長下以 8064 xg收集數據。最后使用SEDFIT軟件擬合干涉數據。REFERENCEYang P, Shi D, Fu J, Zhang L, Chen R, Zheng B, Wang X, Xu S, Zhu L, Wang K. Atomic Structures of Coxsackievirus B5 Provide Key Information on Viral Evolution and Survival. J Virol. 2022 May 11;96(9):e0010522. doi: 10.1128/jvi.00105-22. Epub 2022 Apr 20. Erratum in: J Virol. 2022 Nov 23;96(22):e0157322.Nonclassical Recrystallization非典型晶體結晶發表日期：22 June 2020DOI:doi.org/10.1002/chem.202002873摘要：在材料科學和納米技術領域，對單分散系統中的納米顆粒的大小和形狀表征需求越來越多。到目前為止，沒有非常有效的方式可以依據納米顆粒的大小和形狀進行純化。這里，我們使用一種絕對定量的高分辨率方法——分析型超速離心機(AUC)，是一個非常有效的從納米晶體到介觀晶體來生成納米晶體的方式，達到了迄今為止無人能及尺寸分布(PDIc=1.0001)和形狀。類似于分子積木的結晶，非經典的再結晶去除了“膠體”雜質(即納米顆粒，它們在形狀和大小上與大多數不同)，將它們組裝成一個介觀晶體。在這種情況下，由于介觀晶體既顯示了遠距離排列順序以及較好的納米晶體取向，納米晶體可以大小和形狀選擇性進行組裝。除了產生高度單分散的納米顆粒，這些發現提供了介觀晶體的結晶新思路。目的：用于表征納米晶體及其相應的介觀晶體的摩擦系數比和沉積系數分布。儀器型號：Optima XL I環己烷納米晶體及其相應的介觀晶體。a-d)從環己烷中分離純化出不同批次的納米顆粒沉積系數分布。批次II-IV含有大部分較大的“膠體”雜質，而批次V含有較小的 “膠體”雜質。所有不同的納米晶批次均可獲得介觀晶體。高度純化后得到單分散納米晶體。非擴散修正g(s)包含高分辨率擴散修正c (s)實驗條件：未說明REFERENCEE. Brookes, W. Cao, B. Demeler, Eur. Biophys. J. 2010, 39, 405; b) B. Demeler, UltraScan version 4.0, release 2783. A Comprehensive Data Analysis Software Package for Analytical Ultracentrifugation Experiments. The University of Lethbridge, Department of Chemistry and Biochemistry.http://www.ultrascan3.aucsolutions.com/download.php

2022-12-08 14:47:12分析型超速離心（AUC）文獻快報-12月刊: Cyclization studies of Japanese encephalitis virus non-coding RNA terminal regions乙型腦炎病毒非編碼RNA末端區域的環化研究發表日期：February 2, 2022DOI：https://doi.org/10.1101/2022.02.01.478553摘要：許多黃病毒如登革熱病毒和西尼羅河病毒在其 5' 和 3' 末端區域 (TRs) 進行必要的遠程相互作用，由保守的互補環化序列介導。然而，我們缺乏對日本腦炎病毒 (JEV) 的這種遠程相互作用的深入了解。在這里，我們使用了涉及計算和生物物理工具的廣泛、多方面的方法。我們進行了多角度光散射 (SEC-MALS) 來確定 JEV TR 的絕對分子量，它們的復合物得出結論它們形成 1:1 復合物，并使用分析超速離心 (AUC) 證實了這種相互作用。微型熱泳 (MST) 實驗表明，JEV 的 5' 和 3' TR 與 nM 親和力相互作用，在沒有保守環化序列的情況下顯著降低。據我們所知，這是第一項代表應用三種關鍵生物物理方法（AUC、MST 和 SEC-MALS）研究 RNA-RNA 相互作用的研究。此外，我們進行了計算動力學分析，證實了我們的 MST 研究表明環化序列在 RNA-RNA 相互作用中的重要作用。這種生物學關鍵事件的結合親和力是一個重要的藥理學特征，可以影響治療的潛在競爭性抑制。這一證據還可以影響旨在抑制保守黃病毒環化的藥物干預，從而中斷黃病毒家族的復制。儀器型號：Optima AUC 紫外(UV)檢測系統從沉降速率-分析超速離心獲得的 JEV 5' TR 和 3'TR 的沉降分布圖實驗條件：JEV 5' TR 和 3' TR 的 AUC 沉降速度數據是使用 Beckman Optima AUC 離心機和 AN50-Ti 轉子在 20°C 下收集的。將 JEV 5'TR（214 nM，0.5 OD @260 nm）、JEV 3'TR（224 nM，0.5 OD @260 nm）和 JEV 5'TR 和 3'TR 樣品的 1:1 混合物加載到 2 通道Epon樹脂中心件。以每分鐘 25,000 轉的速度離心樣本，并以 20 秒的間隔收集掃描結果。使用 UltraScan-III 軟件包通過內部超級計算機計算分析所有數據。我們使用二維頻譜分析 (2DSA) 分析 SV-AUC 數據，同時去除時變噪聲、彎液面和底部位置，然后進行增強的 van Holde-Weischet 分析。我們用 UltraScan 估計了緩沖液密度和粘度校正（分別為 1.0269g/cm3 和 1.293 cP）。所有流體動力學參數均在 20°C 和水條件下校正為標準條件。REFERENCETyler Mrozowich, Sean M. Park, Maria Waldl, Amy Henrickson, Corey R. Nelson, Borries Demeler, Ivo L. Hofacker, Michael T. Wolfinger, Trushar R. Patel Cyclization studies of Japanese encephalitis virus non-coding RNA terminal regions.bioRxiv 2022.02.01.478553Competitive inhibition of the classical complement pathway using exogenous single-chain C1q recognition proteins利用外源性單鏈C1q識別蛋白競爭性抑制經典補體通路發表日期：January 12, 2022DOI: doi.org/10.1016/j.jbc.2022.102113摘要：補體亞基C1q是一種先天免疫系統的蛋白復合體，具有特征良好的免疫結合特性，是構成經典補體通路的重要部分。最近的研究發現不管是健康的還是神經退行性疾病的大腦中，C1q在中樞神經中具有突觸消除的作用。然而,c1q相關的突觸吞噬分子機制還不清楚。在這里，我們設計了單體和多聚體的蛋白質結構，包括球形頭部的小鼠C1q的識別部位(C1q球狀部分[gC1q]) 而缺乏膠原樣結構的尾部的一條的單鏈分子(sc-gC1q蛋白)。這些在大腸桿菌表達系統中表達的分子能競爭性抑制C1q的功能，我們通過質譜、分析型尺寸排阻色譜，分析型超速離心機，CD光譜，和ELISA等技術對其結構和結合已知補體通路激活物的能力進行表征。我們進一步使用SPR技術分析了這些分子和免疫球蛋白、神經元之間的相互作用。最終，我們發現sc-gC1qs能夠特異性的抑制C1q的活性。此外，sc-gC1qs與C1q相互競爭結合在胚胎神經元細胞膜上。我們通過sc-gC1qs的體內實驗揭示了C1q在神經元的定位和功能方面的作用，具有潛在的抑制劑治療的用途。目的：用于表征sc-gC1q蛋白的均一性和聚集狀態。儀器型號：Optima XL-1sc-gC1q(藍綠色)、sc-gC1q2(紫色)和sc-gC1q3(粉色) 在分析型超速離心實驗中沉降系數的分布情況。計算得到的sc-gC1q分子質量為49.9±0.4 kDa與由氨基酸序列計算的理論分子量47,811 Da有很好的一致性。sc-gC1q2 分子質量為94.9 ± 0.6 kDa,大部分為二聚體形式，只有少部分以單體存在。sc-gC1q3分子質量51.1±0.5 kDa，也基本以單體存在。實驗條件：對蛋白樣品進行透析，緩沖液為50mm磷酸鈉，200mm NaCl，測量前的pH值為7.5。25 ℃下3000 rpm (700g) 離心20 min穩定溫度，之后45,000 rpm (156,000g)離心，237 nm吸收光檢測，步進0.003 cm，間隔10 min。SEDNTERP計算溶液粘度和密度，SEDFIT擬合結果。REFERENCELaue, T., Shah, B., Ridgeway, T., and Pelletier, S. (1992). In Computer aided Interpretation of Sedimentation Data for Proteins, Royal Society of Chemistry, Cambridge, U.KBrown, P. H., and Schuck, P. (2006) Macromolecular size-and-shape distributions by sedimentation velocity analytical ultracentrifugation. Biophys. J. 90, 4651–4661Amphiphilic Diblock Copolymers Bearing Poly(Ethylene Glycol) Block: Hydrodynamic Properties in Organic Solvents and Water Micellar Dispersions, Effect of Hydrophobic Block Chemistry on Dispersion Stability and Cytotoxicity含聚(乙二醇)嵌段的兩親二嵌段共聚物:有機溶劑和水膠束分散體系中的水動力學性質，疏水嵌段化學對分散穩定性和細胞毒性的影響發表日期：16 October 2022DOI:https:// doi.org/10.3390/polym14204361摘要：盡管兩親性嵌段共聚物已經通過各種方法在普通溶劑和水分散體系中進行了詳細的研究，但它們的流體動力學描述仍不完整。在這篇論文中，作者提出了一個詳細關于六種二嵌段共聚物流體動力學研究的方法，采用動態光散射，粘度法，分析型超速離心法研究了嵌段共聚物在四氫呋喃有機溶劑和水膠束體系中的分布狀態。此研究對于生物醫學，細胞毒性研究都有重要意義。目的：利用分析超速離心(AUC)進行二嵌段共聚物聚集性與流體動力學研究儀器型號：XL-I，An-60Ti，12mm鋁制中心件，2孔樹脂中心件A：在20°C的四氫呋喃溶液中PS-b-PEG，PMMA-b-PEG, PE-b-PEG的沉降系數分布圖B：在20°C的四氫呋喃溶液中PBd-b-PEO, PDMS-b-PEO, PCL-b-PEO的沉降系數分布圖實驗條件：實驗使用貝克曼 ProteomeLab XL-I 分析型超速離心機，沉降速率法，An-60Ti 4孔轉頭，12mm鋁制中心件 (THF solutions), 2孔樹脂中心件(H2O, D2O/H2O)轉速設置范圍為15,000–60,000 rpm, 取決于不同試劑的具體實驗需求。在四氫呋喃溶液中使用最大轉速。樣品與Buffer加樣量為420，20°C平衡溫度2h。使用干涉光學系統進行檢測使用 SEDFIT 軟件c(s)模式分析數據REFERENCEElistratova, A.A.; Gubarev, A.S.; Lezov, A.A.; Vlasov, P.S.; Solomatina, A.I.; Liao, Y.-C.; Chou, P.-T.; Tunik, S.P.; Chelushkin, P.S.; Tsvetkov, N.V. Amphiphilic Diblock Copolymers Bearing Poly(Ethylene Glycol) Block: Hydrodynamic Properties in Organic Solvents and Water Micellar Dispersions, Effect of Hydrophobic Block Chemistry on Dispersion Stability and Cytotoxicity. Polymers 2022, 14, 4361. https:// doi.org/10.3390/polym14204361

2025-04-21 12:45:20飛行時間質譜儀分析方法有哪些？: 飛行時間質譜儀分析方法飛行時間質譜儀（TOF-MS, Time-of-Flight Mass Spectrometry）是一種高效且精確的分析工具，廣泛應用于化學、生命科學、環境監測等領域。其主要特點是通過測量離子飛行的時間來確定其質量，具有高分辨率、快速掃描和廣泛的質量范圍等優勢。本文將詳細介紹飛行時間質譜儀的分析方法，包括其工作原理、應用領域及常見的分析技術。飛行時間質譜儀的工作原理是基于質荷比（m/z）原理。當樣品通過電噴霧或激光脫附等方式被離子化后，離子在電場作用下被加速。不同質量的離子由于受到的力不同，飛行時間也會有所差異。通過測量離子從源頭到檢測器的飛行時間，結合已知的電場強度和加速電壓，就能計算出離子的質量。這一過程無需分離離子，而是通過時間差異直接進行質量分析，從而實現快速、高效的質量鑒定。在TOF-MS分析中，離子源是關鍵組成部分，常見的離子源有激光解吸電離（LDI）、基質輔助激光解吸電離（MALDI）和電噴霧電離（ESI）。MALDI通常用于大分子樣品的分析，如蛋白質和聚合物，因為其可以有效地避免分子碎裂。而電噴霧電離則適用于液體樣品，特別是生物樣品中的小分子物質。通過選擇適合的離子源，TOF-MS能夠應對不同樣品的復雜性，提供準確的質量信息。飛行時間質譜儀的優勢之一是其高分辨率。在傳統的質譜儀中，分辨率受限于離子的分析時間和設備的精度，而TOF-MS通過大范圍的飛行時間差異，能夠實現極高的質量分辨率。這使得它在復雜樣品的分析中表現尤為突出，如環境樣品中微量污染物的檢測、藥物代謝產物的分析等。飛行時間質譜儀還具有較高的靈敏度和快速掃描能力。由于離子在飛行管中的速度較高，TOF-MS能夠在短時間內捕捉到大量的質譜數據，提供豐富的分析信息。尤其在液質聯用（LC-MS）中，飛行時間質譜儀與液相色譜技術的結合使得復雜樣品的分離和定性分析更加高效，能夠對混合物中的成分進行精確鑒定。 TOF-MS在多個領域中的應用也日益廣泛。在生命科學領域，它被用于蛋白質組學、代謝組學和藥物開發中，通過精確的質量分析為疾病機制的研究和新藥的開發提供數據支持。在環境監測領域，TOF-MS能夠檢測空氣、水質和土壤中的微量污染物，為環境保護提供技術保障。TOF-MS在食品安全檢測、法醫鑒定等方面也發揮著重要作用。盡管飛行時間質譜儀具備眾多優點，但其分析過程中仍然存在一些挑戰。例如，高精度的儀器需要高昂的投資和維護成本，而且數據分析過程較為復雜。隨著技術的不斷發展，未來TOF-MS的性能有望得到進一步提升，同時在更加多樣化的領域中得到應用。飛行時間質譜儀作為一項成熟的分析技術，憑借其高分辨率、高靈敏度和快速掃描的特點，在多個學科領域中展現了廣泛的應用前景。隨著技術的不斷進步，它將在更加精細化的分析任務中發揮重要作用，推動科學研究和工業應用的不斷發展。

2025-04-07 14:15:14免疫系統穩度分析方法有什么？: 免疫系統穩度分析方法免疫系統穩度分析是近年來生物醫學研究中的一個重要課題，它對于理解免疫系統在不同生理與病理狀態下的表現至關重要。免疫系統作為人體對抗外界病原的關鍵防線，其功能的穩定性直接影響著個體的健康狀況。因此，如何通過科學的分析方法評估免疫系統的穩度，已成為現代醫學中的研究熱點。本文將深入探討幾種常見的免疫系統穩度分析方法，揭示其在臨床實踐中的應用價值，并為未來的研究提供參考。免疫系統穩度的評估離不開對免疫細胞的定量分析。傳統的免疫學檢測方法，如流式細胞術、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）等，可以通過檢測免疫細胞的種類與數量，判斷免疫系統是否正常。流式細胞術通過對不同細胞表面標志物的識別，可以在單細胞水平上對免疫系統進行詳細分析，從而評估免疫系統的穩度。該方法對于檢測白細胞亞群的變化以及細胞活性具有重要意義，對于免疫穩度的分析提供了基礎數據支持。免疫系統穩度的評估還需要考慮免疫反應的動態平衡。免疫反應不僅僅是免疫細胞數量的變化，還涉及免疫細胞活性的變化以及免疫分子（如細胞因子）的分泌水平。在這一點上，基因表達分析和蛋白質組學技術展現了其重要性。通過高通量測序技術，研究者可以對免疫細胞中基因的表達水平進行監測，揭示免疫細胞在不同病理狀態下的活躍程度。質譜分析等技術可以用于檢測免疫系統中的蛋白質標志物，從而幫助了解免疫反應的具體機制，為免疫穩度的評估提供更加精確的數據支持。除此之外，免疫系統穩度分析還離不開計算機模擬與模型構建的幫助。隨著生物信息學的發展，研究人員可以通過構建免疫系統的數學模型來模擬免疫反應的過程。這些模型能夠整合免疫系統中的各類數據，預測免疫反應的穩定性，并為臨床實踐提供決策支持。免疫系統穩度分析的計算模型不僅能為疾病的早期預測提供依據，還能夠為個體化方案的設計提供理論支持。免疫系統的穩度分析方法不局限于上述幾種技術，隨著技術的不斷發展，新的分析手段也在不斷涌現。未來，免疫系統穩度分析可能會結合更多的多學科技術，如人工智能與機器學習，這將為免疫學研究提供更為全面和的分析工具。免疫系統穩度分析方法在醫學研究和臨床應用中具有重要意義。從傳統的免疫細胞分析，到現代的基因表達與蛋白質組學，再到未來的計算模型和人工智能應用，這些方法的結合將為免疫系統的深入理解與臨床應用提供更廣闊的前景。通過持續的技術創新和跨學科的合作，免疫系統穩度分析方法將在疾病預防、診斷和中發揮更大的作用。