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UCF.ME<sup>?</sup> T7 RNA Polymerase GMP-grade(1 KU/μL)

品牌：翌圣生物
產地：
供應商報價：面議

翌圣生物科技(上海)股份有限公司更新時間：2024-12-24 09:03:45

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詳細介紹

產品描述

本產品是大腸桿菌重組表達來源的噬菌體T7 RNA聚合酶，以含有T7啟動子序列（5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’）的雙鏈DNA為模板，以NTP為底物，合成與啟動子下游的反向單鏈DNA互補的RNA。雙鏈線性平末端或5’突出末端DNA均可作為T7 RNA聚合酶的底物模板，因此線性質粒、PCR產物均可用作體外合成RNA的模板。

注：G*為RNA轉錄的第一個堿基。

本品是按照GMP工藝要求生產，產品以無菌液體形式提供。

產品性質

來源（Source）	重組E. coli
最適溫度（Optimum Temperature）	37℃
宿主核酸殘留（Host nucleic acid residue）	<10 fg/U
宿主蛋白殘留（Host protein residue）	<50 ppm
病原體（HBV/ HCV/HIV）檢測	無檢出
RNA酶殘留（RNase residue）	陰性
內毒素殘留（Endotoxin residue）	<0.05EU/1000U
支原體檢測（Mycoplasma detection）	無檢出
無菌檢測（Sterility testing）	無檢出
儲存緩沖液（Storage Buffer）	50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100，50%（v/v）甘油，pH7.9@25℃
活性單位定義（Unit Definition）	在 37℃、pH8.0 的條件下，1 h內使 1 nmol 的 [³H] GMP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為1個活性單位。

注：具體產品質檢數據及更多指標請查看批次質檢報告

產品組分

編號	組分	產品編號/規格
編號	組分	10613ES92 (10 KU)	10613ES97 (50 KU)	10613ES98 (500 KU)	10613ES99 (5000 KU)
10613-A	T7 RNA polymerase (1 KU/μL)	10 μL	50 μL	500 μL	5 mL
10613-B	10×Transcription Buffer	100 μL	500 μL	1 mL×5	10 mL×5

注：10×Transcription Buffer中含60 mM MgCl₂和100 mM DTT，但不含有NTP，如需請購買本公司NTP set solution 10133。

產品應用

1. 單鏈 RNA合成（包括mRNA，siRNA，gRNA等各類RNA前體，以及同位素標記或非同位素標記的RNA探針）

2. 以（Cap analog）為引物合成Capped mRNA

運輸和保存方法

干冰運輸。-20℃保存，有效期一年。

應用實例

1、按下列體系配制反應體系

組分	體積（μL）	終濃度
10×Transcription Buffer (Mg²⁺ Plus)	2	1×
CTP/GTP/ATP/UTP (100 mM each)	0.4 each	2 mM each
T7 RNA Polymerase (1 KU/μL)	0.5-1	-
RNase inhibitor (40 U/μL)	1	-
RNase free H₂O	Up to 18	-
模板DNA	2 (100 ng-1μg)	-

【注】：
①. DNA模板需要最后加入。由于10×Buffer中含有亞精胺，亞精胺濃度過高會引起DNA模板沉淀。
②. Buffer和水建議放置到室溫，然后開始使用，反應于室溫下配制，防止溫度低引起亞精胺沉淀高濃度DNA模板。
③.若轉錄長度< 100 nt，模板投入量可增加至2 μg。
④. RNase inhibitor (40 U/μL)請購買本公司產品10603。
⑤.為了特定區域的有效轉錄，建議在其區域下游把模板DNA預先切成平端或5′突出末端。