產品簡介

凝膠遷移實驗(也稱凝膠阻滯實驗或電泳遷移率實驗) (Electrophoretic mobility shift assay, EMSA)，也稱Gel Shift，是一種用于研究蛋白與核酸相互作用的高靈敏實驗技術。最初主要用于轉錄因子與啟動子相互作用的驗證性實驗，也可應用于蛋白與DNA、蛋白與RNA相互作用研究。EMSA技術基于進行非變性聚丙烯酰胺或瓊脂糖凝膠電泳時，蛋白質與DNA或RNA復合物的遷移速度比游離線性DNA或RNA片段慢，從而導致DNA或RNA遷移位置在與蛋白質結合時滯后。

該試劑盒包含配置EMSA PAGE凝膠的所有試劑，客戶可搭配蛋白電泳膠制膠組合（Cat# 80813ES）使用。本試劑盒約可配制30-50塊常規大小的EMSA PAGE凝膠，具體可以配制的凝膠數量和凝膠的厚薄以及凝膠的大小有關。

產品信息

產品組分

儲存條件

TBE Buffer (10X)、50% Glycerol和APS室溫保存。40% Acr-Bis (39:1)和TEMED Substitute 4ºC避光保存。有效期1年。

操作方法

1. 準備制備凝膠的模具。可以使用常規的制備蛋白電泳凝膠的模具，如我司的蛋白電泳膠制膠組合（Cat# 80813ES）。最好選擇可以灌制較薄凝膠的模具(如0.75 mm厚度)，以便于干膠、轉膜等后續操作。為獲到更好的條帶分離效果，可以選擇可灌制較大EMSA凝膠的模具。制膠前必須把制膠模具沖洗干凈，需特別注意不能有SDS殘留。

2. 配置10% APS，如稱取0.1 g APS，用蒸餾水溶解，并定容至1 mL，即為10% APS，推薦分裝后使用，避免反復凍融。

3. 配制一塊常用EMSA PAGE膠(膠板寬度為10厘米)所需凝膠溶液體積：0.75 mm厚度凝膠約5 mL；1 mm厚度凝膠約7 mL；1.5 mm厚度凝膠約10 mL。均含約0.5 mL的余量。

4. 制膠

根據目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度，并根據下表配制凝膠：

備注：通常10-30分鐘內膠會凝固。具體的凝固時間和溫度及光照有關，上表中10% APS和TEMED Substitute的正常推薦用量是室溫為25ºC時的推薦用量。為達到與25ºC時相近的凝固時間，當室溫低于25ºC時，可以適當增加10%凝膠聚合催化劑和TEMED Substitute的用量，例如20ºC時建議使用正常推薦用量的1.5倍，15ºC時建議使用正常推薦用量的2倍。

注意事項

1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
2. 本產品僅作科研用途。

Ver.CN20241012