RO4929097是一種γ分泌酶抑制劑小分子，無細胞試驗中IC₅₀為4 nM，抑制Aβ40和Notch的細胞加工，EC₅₀分別為14 nM和5 nM。RO4929097會特異性靶向γ分泌酶，抑制其蛋白酶的活性，從而阻斷Notch的細胞加工，減低Notch信號。研究發(fā)現(xiàn)，Notch信號通路上調(diào)會增加腫瘤發(fā)生幾率。RO4929097是一種潛在的抗腫瘤的小分子藥物，RO4929097能抑制黑色素瘤細胞的生長和人原發(fā)性黑色素瘤異種移植物的腫瘤形成，以及能抑制乳腺癌細胞增殖，減少集落形成。此外，RO4929097還能抑制結(jié)腸癌、胰腺癌、肺癌的生長。臨床實驗發(fā)現(xiàn)，RO4929097還可用于癌癥晚期治療。

產(chǎn)品性質(zhì)

運輸和保存方法

冰袋運輸。粉末直接保存于-20 ºC，有效期3年。用于體外實驗的儲存液建議分裝避光保存，保存于-80 ºC，有效期1年、保存于-20 ºC，有效期半年、保存于2--8 ºC，有效期2周。用于體內(nèi)實驗的儲存液要現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意事項

1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2）粉末溶解前請先短暫離心，以保證產(chǎn)品全在管底。

3）本產(chǎn)品僅用于科研用途，禁止用于人身上。

4）配置的工作液濃度，建議現(xiàn)配現(xiàn)用，當天使用。

5）為了獲得較高的濃度，可以將離心管放在37 ºC水浴鍋加熱10 min；或在超聲波浴中超聲一段時間，確保產(chǎn)品完全溶解。

使用濃度

【RO4929097具體使用濃度請參考相關(guān)文獻，并根據(jù)自身實驗條件（如實驗?zāi)康模毎N類，培養(yǎng)特性等）進行摸索和優(yōu)化。】

相關(guān)實驗（數(shù)據(jù)來自于公開發(fā)表的文獻，僅供參考）

（一）體外實驗

先用DMSO溶解RO4929097粉末，使得母液濃度為50 mM；然后用培養(yǎng)基稀釋成1 μM，分別作用于SUM149 和SUM190細胞，每3-4天更換一次，大約持續(xù)一周^[1]。與對照組相比，發(fā)現(xiàn)RO4929097對SUM149 和SUM190細胞的抑制生長率分別為20 %和10 %。
   RO4929097也可作用于黑色素瘤細胞系。在12孔板上按每孔2.5×10³個接種WM35和 WM98.1細胞，實驗第一天, 更換培養(yǎng)基，加入DMSO或10 μM RO4929097，每3-4天更換一次。在指定時間點, 細胞在10%福爾馬林溶液中混合，然后在4 ^oC下儲存在PBS中。在第18-24天, 使用結(jié)晶紫對實驗板進行染色。使用10%乙酸洗脫顏色，然后在590 nm處讀取光密度。發(fā)現(xiàn)RO4929097抑制黑色素瘤腫瘤形成^[2] 。

（二）體內(nèi)實驗

 RO4929097按3--60 mg/kg劑量口服或者注射給藥攜帶 A549 NSCLC 移植瘤的裸鼠，每天一次或兩次，持續(xù)21天，與對照組相比，發(fā)現(xiàn)RO4929097抑制腫瘤生長，抑制率達 66% 到91%。用60 mg/kg的劑量處理A549細胞，在7--14天發(fā)現(xiàn)只是引起腫瘤衰退；處理21天后，腫瘤生長抑制仍達91%。處理34天后，延遲腫瘤生長抑制效果。實驗第67天，使用相同劑量RO4929097再處理7天，發(fā)現(xiàn)仍具有抗癌效果^[1] 。而且RO4929097作用于過量表達IL6和IL8的腫瘤，不再影響血管新生，或腫瘤相關(guān)成纖維細胞的浸潤^[3] 。

參考文獻

[1] Luistro L, et al. Preclinical profile of a potent gamma-secretase inhibitor targeting notch signaling with in vivo efficacy and pharmacodynamic properties.Cancer Res. 2009, 69(19), 7672-7680.

[2] Huynh C, et al.The Novel Gamma secretase inhibitor RO4929097 reduces the tumor initiating potential of Melanoma. PLoS One. 2011, 6(9), e25264.

[3] He W, et al. High tumor levels of IL6 and IL8 abrogate preclinical efficacy of the γ-secretase inhibitor, RO4929097.Mol Oncol. 2011, 5(3), 292-301.

相關(guān)產(chǎn)品

HB200117