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Human Leptin ELISA Kit 人瘦素ELISA檢測試劑盒
- 品牌:翌圣生物
- 產地:
- 供應商報價:面議
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司
更新時間:2025-04-02 09:01:18
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入駐年限第2年
營業執照已審核
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詳細介紹
瘦素是一種由脂肪細胞分泌產生的蛋白質類激素,它通過抑制饑餓來幫助調節能量平衡,被稱為“饑餓激素”的胃饑餓素可拮抗瘦素發揮作用。瘦素分子量為16 kDa,是由146個氨基酸殘基組成的非糖基化蛋白,人瘦素與小鼠和大鼠的同源性分別為87%和84%,且人瘦素在小鼠和大鼠中可發揮生物學活性。瘦素主要產生于白色脂肪組織的脂肪細胞,也由褐色脂肪組織、胎盤、卵巢、骨骼肌、胃、乳腺上皮細胞、骨髓、胃主細胞和P/D1細胞產生。瘦素的表達情況受體內激素、細胞因子及營養狀態影響,如參與正能量平衡的胰島素和糖皮質激素可促進瘦素表達,而參與負能量平衡的兒茶酚胺則抑制瘦素的表達。在肥胖人群中,瘦素的敏感性降低,導致在能量儲備高的情況下無法察覺飽腹感。
翌圣Human Leptin ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿、細胞培養上清中的人瘦素(Human Leptin)。特異性抗人瘦素抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經過孵育,樣本中存在的人瘦素與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入檢測抗體孵育結合,經洗滌,再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中人瘦素的濃度成正比。加入終止液終止反應,在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產品信息
貨號
97036ES48 / 97036ES96
規格
48 T / 96 T
檢測范圍
15.63-1000 pg/mL
檢測方法
雙抗夾心法
檢測物種
人
檢測時長
5小時
靈敏度
0.586 pg/mL
稀釋線性
81.9 - 96.1 %
回收率
73.9 - 106.9%
板內差
2.9%
板間差
3.6%
實驗數據
- 標曲數據
數據擬合繪制標準曲線,生成的標曲用于實驗數據分析。
標準曲線圖
- 靈敏度檢測
人瘦素的最低檢測限為0.586 pg/mL,通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
- 精密度檢測
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定20次,評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測30次,評估酶標板間的精密度。
項目
板內精密度
板間精密度
樣本
1
2
3
1
2
3
20
20
20
30
30
30
平均值
14.8
98.1
521.1
14.9
98.5
522.4
標準差
0.8
1.4
8.5
1.1
1.9
8.7
變異系數(%)
5.7
1.5
1.6
7.1
1.9
1.7
- 回收率檢測
通過不同水平的人瘦素添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:
樣本類型
平均回收率(%)
范圍(%)
血清
91.7
77.5-106.9
血漿
89.0
75.8-105.3
細胞培養上清
87.9
73.9-101.5
- 稀釋線性檢測
血清稀釋比例
平均期望值(%)
范圍(%)
1:02
91.1
89.6-92.3
1:04
86.9
85.6-88.6
1:08
86.9
85.8-88.1
1:16
91.7
90.7-93.7
血漿稀釋比例
平均期望值(%)
范圍(%)
1:02
91.2
90.6-92.1
1:04
86.2
82.7-88.2
1:08
84.3
82.2-85.5
1:16
91.7
90.7-93.4
細胞培養上清稀釋比例
平均期望值(%)
范圍(%)
1:02
89.2
86.8-93.8
1:04
85.4
83.1-88.5
1:08
86.7
81.9-92.3
1:16
94.6
93.2-96.1
- 樣本
應用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。
樣本類型
樣本數目
平均值(pg/mL)
樣本值(pg/mL)
血清
10
7560.0
645.8-19580.0
肝素血漿
10
9461.5
21.9-20524.6
EDTA血漿
10
11340.4
4056.9-32826.0
枸櫞酸鈉血漿
10
5240.5
1325.3-15307.8
細胞培養上清
10
n.d.
n.d.
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內的15.63 pg/mL。
- 測定特異性
本試劑盒識別天然和重組人瘦素。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
Recombinant human:
Recombinant mouse:
Recombinant rat:
IFN-γ
IL-17A
IFN-γ
IFN-γ
IL-1β
IL-18
IL-1β
IL-1β
IL-2
IL-21
IL-2
IL-4
IL-4
IL-22
IL-4
IL-6
IL-5
IL-23
IL-6
IL-10
IL-6
MCP-1
IL-10
TNF-α
IL-8
TGF-β1
IL-17A
IL-10
TNF-α
TNF-α
IL-12
VEGF
檢測簡圖
疑問解答
問題
造成原因
解決方法
標曲不好
移液量不準確
檢查移液器,按時校準,仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。
稀釋方法不恰當
顯色值偏低
孵育時間太短
給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標準品隔夜后更換。
移液量不足或稀釋不當
校準移液器和規范操作
CV偏高
酶標板清洗不當
使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。
受污染的洗液
準備新鮮洗液
靈敏度較低
試劑盒儲存不當
按照產品組分表進行保存。
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