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PBCV DNA ligase (25 U/μL)
- 品牌:翌圣生物
- 產地:
- 供應商報價:面議
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司
更新時間:2025-04-02 09:01:18
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入駐年限第2年
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詳細介紹
產品簡介
PBCV DNA Ligase,亦稱為SplintR連接酶、PBCV-1 DNA Ligase或Chorella病毒DNA連接酶,是一種ATP依賴的DNA連接酶,能夠高效催化與一條互補的RNA單鏈配對的兩條相鄰DNA單鏈的連接反應。這兩條相鄰的DNA鏈中,提供3'羥基的被稱之為受體DNA鏈(Acceptor DNA),提供5'磷酸的被稱之為供體DNA鏈(Donor DNA),在這個連接過程中需要一條互補的RNA鏈對兩條DNA單鏈起“夾板”或“支架”的作用。PBCV DNA ligase的連接酶活性遠優于傳統的 T4 DNA 連接酶,對以 RNA 為夾板的 DNA 底物(表觀 Km = 1 nM,Km值越小表示親和力越強)表現出親和力,能夠對復雜混合物中獨特的 RNA 種類進行亞納摩爾級檢測,使其應用到高靈敏RNA 檢測技術,非常適合用于許多二代測序和分子診斷等應用中的靶標富集流程。
產品信息
貨號
14962ES80 / 14962ES90
規格
1,250 U / 5,000 U
來源
E.coli 表達的來源于Chorella virus的 PBCV-1 DNA Ligase基因
分子量
34 KD
酶活定義
一個單位定義為在25℃,15 min內,于1X PBCV Ligase buffer中,將2 pmol的FAM標記的DNA:RNA雜合底物連接所需的酶量(至少達到50%的完成度)
酶保存液
10 mM Tris-HCl , 300 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% (v/v) Glycerol pH 7.4 @ 25℃
反應條件
50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM ATP, 10 mM DTT, pH7.5 @25℃
濃度
25 U/µL
純度
>95% (SDS PAGE)
失活條件
65℃,20 min
組分信息
組分編號
組分名稱
14962ES80
14962ES90
14962-A
PBCV DNA ligase (25 U/µL)
50 µL
200 µL
14962-B
10 x PBCV Ligase buffer
1 mL
1 mL
產品應用
1.基于探針法的microRNA等小RNA的檢測;
2.通過互補RNA序列進行“夾板”固定的單鏈DNA的連接;
3.使用DNA探針進行連接達到檢測特定RNA的目的;
4.SNP或可變剪接的檢測;
5.RASL-seq分析。
儲存條件
-25~-15℃保存,有效期2年。
使用說明
推薦配置應用反應與體系:
組分
體積
10 x PBCV Ligase buffer
2 µL
底物(Substrate)(1 µM)
2 µL
PBCV DNA ligase (25 U/µL)
1 µL
H2O
15 µL
Total
20 µL
25°C反應15-60 min ; 65°C失活20 min
注意事項
1.本品在ATP濃度(10 µM - 1 mM)和pH(6.5 - 9)范圍內都具有活性。在 Mg2+ > 5 mM,pH 值位于 7.5 至 8.0 的條件下,可觀察到最佳活性。較高溫度(高達37℃)和補充5 mM Mn2+ 可以增強該酶活性。鹽濃度超過100 mM會抑制反應。
2.為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
3.本產品僅作科研用途。
Ver.CN20240513
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