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PNGase F(N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)
- 品牌:翌圣生物
- 產地:
- 供應商報價:面議
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司
更新時間:2024-12-24 09:03:45
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入駐年限第1年
營業執照已審核
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詳細介紹
產品描述
N-糖苷酶 F (PNGase F)是一種酰胺水解酶,經過和平空間站伊麗莎菌克隆,主要由腦膜炎膿桿菌等革蘭氏陰性菌分泌。并在 E. coli大腸桿菌中重組表達,可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復雜的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位點為糖蛋白內側N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵,同時將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉化為天冬氨酸。本產品帶his和sumo標簽,常應用于抗體及其相關蛋白完全去糖基化。
產品性質
中文別名(Chinese synonym)
N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶 F
英文別名(English synonym)
PNGase F
來源(Source)
大腸桿菌表達
分子量(Molecular weight)
48.4 kDa
比活性(Specific activity)
50000 U/mL
緩沖液組分(Buffer)
20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50%Glycerol
酶活定義(Unit Definition)
1個酶活力單位指在10 μL的反應體系中,37℃條件下1小時從10 μg變性RNase B中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。
產品組分
編號
組分名稱
組分成分
產品貨號/規格
20411ES01
20411ES02
20411-A
PNGase F
PNGase F
15000 U
75000 U
20411-B1
Buffer 1(10×)
5% SDS; 400 mM DTT
150 μL
750 μL
20411-B2
Buffer 2(10×)
200 mM Tris, PH 7.5
300 μL
1500 μL
20411-B3
10% NP-40
10% NP-40 in MilliQ-H2O
300 μL
1500 μL
運輸和保存方法
干冰運輸;-20℃保存;有效期12個月。
使用方法
1、變性條件下蛋白質去糖基化:
1)在水中加入1 μL Buffer 1和目標糖蛋白(1-20 μg),至終體積10 μL;
2)100℃溫度下煮沸10 min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;
3)加入2 μL的Buffer 2、2 μL的10%NP-40、6 μL去離子水,總反應體積20μL;
4)加入2 μL的PNGase,輕輕混勻。在37℃孵育1-3 h。
2、非變性條件下蛋白質去糖基化:
1)在水中加入2 μL的Buffer 2和目標糖蛋白(1-20 μg)至最終體積為 20 μL。
2)加入 2~5 μL 的 PNGase F, 輕輕混勻。
3)37°C 孵育 4-24 h。
注意:在變性條件下大多數底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加PNGase F的量和延長孵育時間。
注意事項
1、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2、本產品僅作科研用途!
HB221031
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