產品簡介

弗氏佐劑(Freunds Adjuvant)由Jules Freund在20世紀40年代發明，它是將抗原水溶液與油劑等量混合，再加乳化劑制成油包水的抗原乳劑，是目前動物實驗中最常用的佐劑。弗氏佐劑分為含結核桿菌的弗氏完全佐劑(Complete Freund's Adjuvant, CFA)和不含結核桿菌的弗氏不完全佐劑(Incomplete Freund's Adjuvant, IFA)，主要用來誘導小鼠膠原誘導的關節炎CIA模型和佐劑誘導的關節炎AA模型。

60718ES Complete Freund's Adjuvant 弗氏完全佐劑(CFA) 包含熱殺死的非活性化結核桿菌，由石蠟油包水乳劑組成，刺激強烈且可引起持久的免疫反應，可用于誘導小鼠的持續性炎癥疼痛模型等，主要引起Th1細胞免疫應答。

60719ES Incomplete Freund's Adjuvant 弗氏不完全佐劑(IFA) 刺激的免疫反應較弱，與弗氏完全佐劑(CFA) 相比，缺少結核桿菌這一成分，主要誘導Th2細胞免疫應答。

在大多數實驗中，弗氏完全佐劑(CFA)一般用于初次免疫，弗氏不完全佐劑(IFA) 用于初次免疫后的加強免疫，倆者皆廣泛用于膠原誘導性關節炎（CIA）和佐劑誘導的關節炎（AA）模型。

產品信息

儲存條件

2~8℃保存，有效期2年。

使用說明

【具體使用濃度請參考相關文獻，并根據自身實驗條件等進行摸索和優化，以下濃度及步驟僅供參考】

1. 膠原誘導性關節炎 (collagen-induced arthritis,CIA)建模的使用步驟（僅供參考）

1）小鼠模型

造模方法：將牛二型膠原（CⅡ）溶液與完全弗氏佐劑（CFA）在4℃（冰?。o菌的條件下等體積混合乳化，配制成Ⅱ型膠原乳劑。將該乳劑注射于小鼠尾根部皮內0.1-0.2 mL，使小鼠引發炎癥，在注射后的第21日再于小鼠的腹腔中注射0.1-0.2 mL的Ⅱ型膠原乳劑作為激發注射。首次免疫注射后，小鼠會出現局部的炎癥刺激反應，1周左右就會愈合；而致炎后的24天小鼠會出現關節腫脹，從后足發展到前足再到尾部。

2）大鼠模型

造模方法：將牛二型膠原（CⅡ）溶液與不完全弗氏佐劑（IFA）混勻乳化，第1天于大鼠多部位皮內免疫注射，1周后腹腔注射加強免疫，二次免疫3-7天內即可得到模型。在致敏7天后，踝關節會輕度腫脹和皮膚發紅，3周后癥狀加重，甚至皮膚發生潰瘍；5- 6周后病理改變進一步加重，關節軟骨及軟骨下骨質均受血管翳的侵蝕和破壞。

2. 佐劑誘導的關節炎(adjuvant Arthritis,AA)建模的使用步驟（僅供參考）

造模方法：用于大鼠皮內注射致炎，一般于致炎后10-20天出現續發炎性癥狀，約在20天達到高峰。炎癥表現以踝關節為重，可侵及足墊和全足。

3. 卵蛋白誘導性關節炎建模的使用步驟（僅供參考）

造模方法：多數采用大鼠，將卵蛋白溶解于生理鹽水配成20 g/L的溶液，與等量弗氏佐劑充分混合，于動物背部皮下注射，連續3周每周注射1次，第5周于關節內注入5 mg溶解的卵蛋白。該模型發病率高，卵蛋白誘發的關節炎模型病理改變明顯，且炎癥持續時間久。

4. 制備抗體的使用步驟（僅供參考）

1）用生理鹽水或者緩沖液把抗原稀釋至適當濃度，具體抗原用量及注射量需根據免疫要求確定。

2）根據所需注射量配制乳狀液，實驗表明較好的使用比例是30-50%，30%的抗原含量乳化后較粘稠，50%的抗原含量乳化后粘性有所降低。夏季建議使用低濃度乳化，冬季建議使用高濃度乳化。

3）充分混均佐劑與抗原，使抗原乳化，制備成“油包水”乳狀液，給動物進行注射。

5. 制備抗體時的免疫方案（僅供參考）

1）多抗制備的免疫方案

制備多抗時，可采用同一種免疫部位注射，也可以多種部位注射，但初次免疫建議在皮下進行。免疫劑量根據被免疫的動物、免疫部位以及抗原本身確定。以皮下注射為例，兔子首次免疫的抗原一般在200-1000 μg之間，大鼠首次免疫的抗原一般在100-500 μg之間，小鼠首次免疫的抗原一般在10-100 μg之間。

首次免疫后，一般抗體親和力不夠，需要在首次免疫后的3-4周進行加強免疫，加強免疫的劑量一般為首次免疫劑量的20%-50%。尾靜脈或脾內方式的加強免疫可減少至1-10 μg之間。第二次、第三次的加強免疫間隔可以縮短至2-3周，間隔太短起不到加強的效果，還易引起免疫耐受；相隔太久，前面的免疫會失去初步刺激的效果。如果采用脾內免疫，則可以縮短免疫周期，加強免疫的次數一般為3次。

2）單抗制備的免疫方案

單抗制備時，免疫動物一般第一針采用皮下免疫，后面的加強免疫采用腹腔免疫或皮下免疫，免疫周期和多抗相似。以小鼠為例，一般皮下注射每個注射點注射30-50 μL左右混有佐劑的抗原，每只小鼠注射6-8個點。

注意事項

1. 本產品長期靜置可能會有少量的沉淀，使用前請充分混勻。
2. 請勿吸入、吞咽或者直接接觸皮膚和眼睛。
3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
4. 本產品僅用于科研用途，禁止用于人身上。

Ver.CN20240112