培養(yǎng)方法

一、細胞名稱：SUP-T1

二、貨    號：BNCC339976

三、生長特性：  □貼壁       ■懸浮      □ 半懸浮半貼壁

四、細胞生長條件：

五、組成：

六、細胞接收后的操作流程與注意事項

1. 您收到細胞時，若干冰已經完全融化，請立即將細胞復蘇培養(yǎng)，切勿再次低溫凍存；若尚留有干冰，請立即將含有細胞的凍存管放入液氮中保存待用，并按指定條件貯存細胞，切不可將細胞置于高溫環(huán)境。

2. 請您在接收細胞后的4周內及時做復蘇培養(yǎng)，以確認細胞活力、狀態(tài)并保種。逾期恕不受理售后問題，謝謝合作！

3. BNCC凍存細胞采用優(yōu)化配比的細胞凍存液，無需離心，細胞解凍后直接將250 ul細胞懸液滴入裝有8-10 ml完全培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。

七、貼壁細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵守無菌操作）

1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 含0.25% EDTA的胰酶進行消化（注意把握消化時間，通常控制在1~2min）；

2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小時去掉胰酶，加6~8 ml 完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散；

3. 取出部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當的完全培養(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4. 注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%以后重復傳代操作或者凍存。

八、懸浮細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵守無菌操作）

1. 懸浮細胞常規(guī)傳代操作為半量換液，分瓶傳代，即取出一半細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當的完全培養(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；也可根據細胞密度分多瓶傳代。

2. 注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。

九、半貼壁半懸浮細胞培養(yǎng)注意事項（請嚴格遵守無菌操作）

1. 若懸浮細胞較多且折光率良好，可離心收集，繼續(xù)培養(yǎng)。

2. 若有少量細胞懸浮，也可不用收集，傳代操作按常規(guī)貼壁細胞操作流程處理。

3. 若懸浮細胞較多，離心收集，原瓶中貼壁細胞按照常規(guī)規(guī)貼壁細胞操作流程進行消化、終止消化、吹打，并與之前收集的懸浮細胞混懸，分瓶培養(yǎng)。

十、細胞任何售后問題，均需拍照存檔并及時聯系客服。