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正常人胰管上皮細胞
- 品牌:北納生物
- 型號: BNCC338221
- 產地:北京 朝陽區
- 供應商報價:面議
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北京北納創聯生物技術研究院
更新時間:2022-07-22 10:46:09
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銷售范圍售全國
入駐年限第6年
營業執照已審核
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詳細介紹
資源編號:BNCC338221
英文名: hTERT-HPNE
提供形式: P4-5代T25細胞培養瓶
培養方法
培養基 75% DMEM without glucose 25% Medium M3 Base 5% fetal bovine serum 10 ng/ml human recombinant EGF 生長條件 95%空氣+5%二氧化碳 生長特性 貼壁生長 存儲條件 90%完全培養基+10%DMSO 一、細胞名稱:hTERT-HPNE
二、貨號:BNCC338221
三、生長特性: ■ 貼壁 □ 懸浮 □ 半懸浮半貼壁
四、細胞生長條件
培養基 90% DMEM 血清 10% FBS 溫度 37 ℃ 空氣條件 5% CO2,95% AIR 生長代數 P4-5 凍存條件 培養基50%、血清40%、DMSO 10% 五、組成:
組成 規格 細胞一瓶 T25 細胞培養與操作說明 1份 六、細胞接收后的操作流程與注意事項
1. 細胞收到后建議在培養箱穩定4小時左右再依據細胞密度,換液培養或傳代。
2. 如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態,請將懸浮的細胞及時離心,加15%血清的完全培養基到新的培養皿/瓶中繼續培養3天;同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養基,培養2-3天。若3天后細胞都沒有出現增殖而是繼續脫落死亡,請及時聯系實驗室,技術人員會跟進解決。
3. 貼壁細胞生長緩慢:適當提高血清濃度(ZG不超過20%),或可根據該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養瓶繼續培養。
4. 生長不均:貼壁細胞若出現生長不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重新打散細胞,加入新鮮培養基進行培養。
七、細胞常規培養傳代流程(請嚴格遵守無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% EDTA的胰酶消化(注意把握消化時間,通常控制在1~2min)。
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁運動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落、吹散。
3. 取出部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的完全培養基,于培養箱中培養。
4. 注意培養基PH值變化情況,定期換液,待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。
特別注意:(如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養,建議添加雙抗培養)
1. 收到細胞后請盡快更換為含10% FBS的新鮮培養基,切勿使用原瓶中運輸用培養基。
2. 如簽收時出現培養瓶壁破裂,漏液等情況請及時拍照并聯系實驗室。
3. 細胞任何售后問題,均需拍照存檔并及時聯系客服。