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2025-01-10 17:04:26片段篩選平臺(tái)
片段篩選平臺(tái)是一種基于化學(xué)信息學(xué)和生物技術(shù)的藥物研發(fā)工具。它利用高通量篩選技術(shù),對(duì)大量小分子片段進(jìn)行快速、系統(tǒng)的檢測(cè),以識(shí)別具有生物活性的候選分子。該平臺(tái)廣泛應(yīng)用于新藥發(fā)現(xiàn)、藥物優(yōu)化及靶標(biāo)驗(yàn)證等領(lǐng)域。技術(shù)優(yōu)勢(shì)在于能夠顯著提高篩選效率、降低研發(fā)成本,并加速藥物研發(fā)進(jìn)程。片段篩選平臺(tái)在推動(dòng)藥物研發(fā)創(chuàng)新、提升藥物研發(fā)成功率方面發(fā)揮著重要作用。

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2023-03-20 12:39:19厭氧菌、絲狀菌等的培養(yǎng)、篩選真的很難嗎?
新型益生菌高通量厭氧發(fā)酵技術(shù)及應(yīng)用我們使用BioLector XT對(duì)益生菌兩岐雙岐桿菌進(jìn)行厭氧分批培養(yǎng)和補(bǔ)料分批培養(yǎng),展示其操作的簡(jiǎn)單易用性和可行性。您在做絲狀真菌嗎? ——利用BioLector高通量培養(yǎng)絲狀真菌BioLector系統(tǒng)適用于絲狀真菌如里氏木霉的高通量發(fā)酵,可獲得與傳統(tǒng)搖瓶發(fā)酵基本相同的形態(tài)、纖維素酶產(chǎn)量和生長(zhǎng)動(dòng)力。并且利用BioLector的光學(xué)在線測(cè)量能力可應(yīng)用于包括基于報(bào)告基因的纖維素酶誘導(dǎo)的估算以及生長(zhǎng)速率的在線測(cè)量。微生物反應(yīng)器可以進(jìn)行細(xì)胞裂解、應(yīng)激及毒性篩選的測(cè)定嗎?BioLector XT高通量微型生物反應(yīng)器它可以同時(shí)進(jìn)行48個(gè)樣品的平行培養(yǎng),每個(gè)培養(yǎng)體積為微升級(jí)別,并可以在線檢測(cè)各種信號(hào),實(shí)現(xiàn)靈活補(bǔ)料和PH調(diào)控,且整個(gè)過程無需人員值守。因此無需改變?nèi)魏闻渲茫图瓤梢詽M足微生物的高通量培養(yǎng),又可以進(jìn)行細(xì)胞裂解、應(yīng)激及毒性篩選的測(cè)定。
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2023-05-17 13:40:03AccuSizer 顆粒計(jì)數(shù)器用于蛋白質(zhì)配方篩選和 USP <787> 測(cè)試
全文共 1386 字,閱讀大約需要 5 分鐘AccuSizer? 自動(dòng)顆粒計(jì)數(shù)分析儀可用于蛋白質(zhì)配方優(yōu)化,最 大程度地減少蛋白質(zhì)聚集并執(zhí)行 USP 亞可見顆粒物質(zhì)測(cè)試。簡(jiǎn)介動(dòng)態(tài)光散射 (DLS) 是檢測(cè)蛋白質(zhì)粒徑的標(biāo)準(zhǔn)工具,但該方法不提供濃度信息。AccuSizer? 單粒子光學(xué)傳感技術(shù) (SPOS) 系統(tǒng)可用于檢測(cè)聚集蛋白粒徑和濃度,可測(cè)量150nm以上的聚集蛋白濃度。圖 1 顯示了單抗產(chǎn)品熱應(yīng)激前后的 Nicomp? DLS 結(jié)果。加熱后的結(jié)果(藍(lán)色)顯示了高分辨率的多峰結(jié)果,包括從~150 nm開始的較大的聚集峰。AccuSizer 無法檢測(cè)到 10 nm 的顆粒,但可以提供 >150 nm聚集蛋白的定量數(shù)據(jù)。在這項(xiàng)研究中,AccuSizer FX Nano 用于研究各種配方穩(wěn)定化學(xué)物質(zhì)如何影響NIST標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的最 終聚集狀態(tài)。AccuSizer FX Nano也可用于 USP 亞可見顆粒物測(cè)試1。材料使用的蛋白質(zhì)是 NIST 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 8671,批號(hào) 14HB-D002,NIST mAb,人源 IgG1k 單抗2。在Nicomp動(dòng)態(tài)光散射(DLS)系統(tǒng)上,使用35mw激光二極管源,APD檢測(cè)器測(cè)量蛋白質(zhì)的初次粒徑。在配備兩個(gè)傳感器的AccuSizer FX Nano SIS系統(tǒng)上測(cè)量蛋白質(zhì)聚集體:LE-400; 0.5 – 400 μm 和 FX Nano; 0.15 – 10 μm.SIS進(jìn)樣器提供精確的樣品體積,最 小進(jìn)樣量低至100 μL且可回收。iFormulate3(圖 2)板預(yù)裝了配方,由 DoE 設(shè)計(jì)用于合理的配方開發(fā),用于測(cè)試配方的聚集水平。評(píng)估了蛋白配方的四個(gè)主要影響因素;pH、離子強(qiáng)度、緩沖液和穩(wěn)定劑濃度。使用的 iFormulate 板測(cè)試了以下影響因素:? pH:5 – 7.6? 離子強(qiáng)度:0 – 200 mM NaCl? 海藻糖穩(wěn)定劑:0 – 10 %? 緩沖液濃度:10 – 50 mM方法將 NIST mAb 解凍并稀釋至 1 mg/mL,將 160 μL 過濾的去離子水添加到 iFormulate 板的每個(gè)孔中。每孔加入40 μL NIST mAb。將培養(yǎng)皿置于60°C(剛好低于蛋白質(zhì)熔點(diǎn))的烤箱中24小時(shí)。使用 AccuSizer 顆粒計(jì)數(shù)器分析每個(gè)孔。將>0.15 μm(總)和>0.53 μm的顆粒計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)提交給iformula,由iformula進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和穩(wěn)定性建模。結(jié)果數(shù)據(jù)使用帕累托分析方法處理,帕累托分析方法在多影響因素下十分有效。帕累托分析給出了影響因素排名和影響因素之間的相互作用。圖 3 和圖 4 分別顯示了 >0.15 μm 和 >0.53 μm 的帕累托分析。顏色表示配方變量對(duì)增加的顆粒計(jì)數(shù)的相對(duì)重要性,藍(lán)色 = 重要,灰色 = 臨界,紅色 = 不太重要。下面的結(jié)果顯示了不同條件下聚集效應(yīng)的 3D 響應(yīng)曲面圖。這種設(shè)計(jì)空間提供了通過檢測(cè)在兩個(gè)粒徑范圍內(nèi)顆粒濃度的方法,以此來確定可最 大限度減少聚集配方。圖 5 和圖 6 顯示了在保持緩沖液和 NaCl 濃度不變的情況下,改變 pH 值和穩(wěn)定劑(海藻糖)的結(jié)果。圖5 pH值和穩(wěn)定劑的影響>0.15μm圖6 pH值和穩(wěn)定劑的影響>0.53μm圖 7 和圖 8 顯示了不同 NaCl 和穩(wěn)定劑(海藻糖)濃度的結(jié)果,同時(shí)保持緩沖液濃度穩(wěn)定且 pH 值從 5.91 略微變化到 6.3。圖7 NaCl和穩(wěn)定劑的作用>0.15μm圖8 NaCl和穩(wěn)定劑的作用>0.53μm然后對(duì)這些結(jié)果以及此處未顯示的其他結(jié)果進(jìn)行整理,圖9和圖10顯示了最 小粒子數(shù)優(yōu)化圖。圖9 顆粒最 小化圖>0.15μm圖10 顆粒最 小化圖>0.53μm結(jié)論此處顯示的結(jié)果表明,可最 大程度減少顆粒計(jì)數(shù)并因此減少蛋白質(zhì)聚集的最 佳化學(xué)制劑為:pH = 6.1 – 6.3NaCl = 40 – 70 mM海藻糖 = 7 – 8%緩沖液 = 50 mMAccuSizer也可用于在≥10和25μm的條件下進(jìn)行USP<787>測(cè)試,并可使用A2000 USP微孔板分析儀實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。
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