產(chǎn)品描述

LysoTracker®系列探針是對活細胞中的酸性區(qū)室進行選擇性染色的一類熒光染料，該類探針具有幾大重要的特點，1）選擇性標記酸性細胞器；2）納摩爾級（nM）濃度即可有效標記活細胞；3）具有多色探針提供，可根據(jù)情況對樣品進行多標實驗。LysoTracker®結(jié)構(gòu)上由一個熒光基團和相連的弱堿基構(gòu)成，可自由穿過細胞膜，一般聚集在球形細胞器上，適用于觀察溶酶體內(nèi)部生物合成及相關(guān)發(fā)病機理。Lysotracker中性pH下僅僅發(fā)生部分質(zhì)子化，因此該探針標記細胞器的原理可能與其完全質(zhì)子化并滯留在細胞器膜上有關(guān)。

本品LysoTracker® Red DND-99為紅色熒光標記的溶酶體探針，具有577/590 nm的最大激發(fā)/發(fā)射波長。本品以溶于無水DMSO的1mM儲存液形式提供。

產(chǎn)品性質(zhì)

運輸和保存方法

室溫運輸。-20℃避光保存，有效期1年，避免反復(fù)凍融。

注意事項

1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2）本產(chǎn)品僅作科研用途！

使用方法

使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作濃度需根據(jù)不同的實驗要求、細胞類型、細胞或組織的膜通透性等進行優(yōu)化。

1. 工作液的配制

利用培養(yǎng)基或合適的緩沖液將1 mM 儲存液稀釋至工作濃度，推薦工作液濃度為50-75 nM；

【注】：為了降低探針加載過度可能引起的假陽性，建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。

2. 染色

2.1 對于貼壁細胞

1）將細胞置于培養(yǎng)皿中的蓋玻片上，加入合適培養(yǎng)基，使其爬片生長。

2）待細胞生長到合適豐度，吸除培養(yǎng)液，加入適量37℃預(yù)熱的含探針工作液。于生長狀態(tài)下孵育30 min～2 h（具體孵育時間需根據(jù)細胞類型而定）。

3）利用新鮮培養(yǎng)基替換上述染色液并在熒光顯微鏡（含合適濾片）下觀察。若染色不夠充分，建議增加染料濃度或延長染色時間。

2.2 對于懸浮細胞

1）離心，吸除上清。

2）利用37℃預(yù)熱的探針工作液重懸細胞，于生長狀態(tài)下孵育30 min～2 h（具體時間需根據(jù)細胞類型而定）。

3）離心，吸除染色液，加入新鮮培養(yǎng)液重懸細胞。

4）置于熒光鏡（含合適濾片）下觀察。若染色不夠充分，建議增加染料濃度或加長染色時間。

【注】：對于懸浮細胞，也可將細胞貼附于經(jīng)BD Cell-Tak處理過的蓋玻片上，然后使用類似于貼壁細胞的方法進行染色。

HB211228